研究原花青素对有氧运动 自由基中自由基代谢有什么意义

健身操和瑜伽交替练习对人体自由基代谢影响的研究
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发布时间: 来源:中国论文援助中心 发布者:芮成钢 阅读:
【摘要】 1研究目的目前,有关健身操和瑜伽单独健身功能的研究报道较多,但将两者结合起来看其健身功效的研究尚未见有关报道,本试验研究主要探讨有氧操和瑜伽交替练习对女大学生自由基代谢及抗氧化系统的影响,为全民健身提供更多的方式和科学理论依据。2研究方法以曲阜师范大学初次参加健身操和瑜伽练习的35名健康女大学生为研究对象,练习时间为12周,并随机抽取该校未参加系统健身锻炼的35名健康女大学生为对照组。练习前后,分别对运动组及对照组抽取肘静脉血测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)、黄嘌呤氧化酶(XOD)的活性和丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)的含量。所有数据用SPSS18.0统计软件进行独立样本T检验。3实验结果3.1健身操和瑜伽练习前,运动组和对照组血清各个指标均没有显著性差异。3.2经过12周有氧练习后,运动组血清SOD活性与运动前相比非常显著性升高(P&0.01), CAT、GSH-PX活性明显升高(P&0.05),GSH含量明显升高(P&0.05)MDA含量和XOD活性明显下降(P&0.05)。3.3经过12周练习后,运动组女生血清SOD、CAT活性非常显著高于对照组(P&0.01),GSH含量显著上升(P&0.05),GSH-PX活性显著高于对照组(P&0.05),MDA含量、XOD活性明显低于对照组(P&0.05)。4结论健身操和瑜伽练习可以使女大学生血清SOD、CAT、GSH-PX活性和GSH含量显著升高,MDA含量和XOD活性明显下降。表明有氧锻炼可以明显提高人体抗氧化系统的功能,降低机体自由基的含量,延缓机体的衰老。1. 选题依据 7
2 研究综述 7-13
2.1 自由基生物学概述 7-8
2.2 自由基与运动 8
2.3 抗氧化防御系统 8-9
2.4 运动训练对自由基代谢和抗氧化系统的影响 9-11
2.4.1 急性运动对自由基代谢的影响 10
2.4.2 有氧运动对机体自由基代谢的影响 10-11
2.5 有氧运动抗氧化效应的机制 11-12
2.5.1 有氧运动减少氧自由基生成 11-12
2.5.2 有氧运动增强抗氧化酶活性 12
2.5.3 有氧运动减轻线粒体DNA(mtDNA)损伤 12
2.6 健身操和瑜伽 12-13
3 实验研究 13-14
3.1 研究对象 13
3.2 研究方法 13
3.3 运动模式和采血 13
3.4 检测指标及方法 13-14
3.4.1 指标测定 13-14
3.4.2 实验仪器 14
4 研究结果 14-15
5 分析讨论 15-23
5.1 有氧操和瑜伽练习对女大学生血清抗氧化酶系的影响 15-22
5.1.1 有氧操和瑜伽练习对女大学生血清MDA含量的影响 15-16
5.1.2 有氧操和瑜伽练习对女大学生血清GSH含量的影响 16-17
5.1.3 有氧操和瑜伽练习对女大学生血清SOD活力的影响 17-19
5.1.4 有氧操和瑜伽练习对女大学生血清CAT活力的影响 19-20
5.1.5 有氧操和瑜伽练习对女大学生血清GSH-PX活力的影响 20-21
5.1.6 有氧操和瑜伽练习对女大学生血清XOD活力的影响 21-22
5.2 有氧操和瑜伽练习对女大学生自由基代谢和抗氧化能力的影响 22-23
6 结论 23-24
7 参考文献 24-28
8 在校期间发表论文情况 28-29
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原花青素及运动对人体血液代谢指标影响的研究
山西大学 2013届硕士学位论文原花青素及运动对人体血液 代谢指标影响的研究作者姓名 指导教师 学科专业 研究方向 培养单位 学习年限雷艳红 吴丽君教授 运动人体科学 运动人体结构与机能研究 体育学院 2010年9月至2013年6月二。一三年六月 Thesis forMaster’SDegree,Shan对University,2011The Effects of Procyanidins and ExerciseonHuman Blood MetabolismStudent Name SupervisorLei YanhongProf.Wu LijunHumanMajorSpecialtyMovement ScienceMovement and Human AnatomySchool of Physical Education 20 1 0.09―20 1 3.06DepartmentResearch DurationJune,2013 目录中文摘要……………………………………………………………………………………IABSTRACT………………………………………………………………………………………………………..III1文献综述…………………………………………………………………………………11.1原花青素概述……………………………………………………………………….1 1.2氧自由基概述……………………………………………………………………….2 1.3核磁共振技术……………………………………………………………………….2 1.4国内外研究动态…………………………………………………………………….31.4.1运动与自由基………………………………………………………………一3 1.4.2原花青素的安全性…………………………………………………………..41.4.3原花青素与运动代谢………………………………………………………一5 1.4.4人体自由基的清除…………………………………………………………..6 1.4.5运动对代谢组学的影响……………………………………………………..72研究对象与研究方法……………………………………………………………………82.1实验对象与分组…………………………………………………………………….82.2药物选取…………………………………………………………………………….82.3运动方式及方案…………………………………………………………………….8 2.4实验设计及流程…………………………………………………………………….8 2.5实验中主要的仪器、设备与试剂………………………………………………….92.6血样的采集………………………………………………………………………….92.7检测指标与方法…………………………………………………………………….9 2.7.1氧自由基(FORT)的测试…………………………………………………..9 2.7.2抗氧化指标(FORD)的测试………………………………………………1 O2.7.3核磁共振的检测……………………………………………………………..10 2.8统计学分析…………………………………………………………………………1 1 3实验结果……………………………………………………………………………….133.1补充原花青素15天对机体血液代谢指标的影响……………………………….13 3.1.1补充原花青素前后机体氧自由基含量的变化……………………………13 3.1.2补充原花青素前后机体抗氧化指标值的变化……………………………143.1.3补充原花青素前后机体含1H类代谢物含量的变化…………………….14 3.2无氧运动对机体血液代谢指标的影响……………………………………………163.2.1无氧运动前后机体氧自由基含量的变化…………………………………16 3.2.2无氧运动前后机体抗氧化指标值的变化…………………………………17 3.2.3无氧运动前后机体含1H类代谢物含量的变化………………………….18 3.3运动恢复1h后机体血液代谢指标的影响……………………………………….21 3.3.1恢复恤后机体氧自由基含量的变化……………………………………..21 3.3.2恢复1h后机体抗氧化指标值的变化……………………………………..22 3.3.3恢复lh后机体含1H类代谢物含量的变化………………………………234讨论与分析…………………………………………………………………………….264.1服用原花青素及运动对机体血液氧自由基含量的影响…………………………26 4.2服用原花青素及运动对机体血液抗氧化指标的影响……………………………28 4.3服用原花青素及运动对机体血液LDL含量的影响…………………………….30 4.4服用原花青素及运动对机体血液乳酸含量的影响………………………………32 4.5服用原花青素及运动对机体血液柠檬酸含量的影响……………………………355结论…………………………………………………………………………………….37参考文献………………………………………………………………………………….38 攻读学位期间取得的研究成果………………………………………………………….45致{射…………………………………………………………………………………………………………………….46 个人简历及联系方式…………………………………………………………………….47 承诺书…………………………………………………………………………………….48学位论文使用授权声明………………………………………………………………….49 C ontcntsChinese abstract………………………………………………………………………………………………………I Abstract…………………………………………………………………………………………………………………III l Cultural heritage overview……………………………………………………………………………………‘1 1.1 An overview ofthe procyanidins……………………………………………………………………?1 1.2 An overview ofoxygen free radicals………………………………………………………………。2 1.3 Nudear magnetic 1.4 Domestic andresonancetechnique……………………………………………………………‘2foreignresearch dynamic…………………………………………………………?‘31.4.1 Exercise and free radicals………………………………………………………………………?3 1.4.2 The securityofprocyanidins…………………………………………………………………?‘5 and movement……………………………………………??51.4.3 Metabolism ofprocyanidins1.4.4 The human body free radical clearance……………………………………………………6 1.4.5 Teams ofmetabonomics…………………………………………………………………………7 2 Research 2.1objectsand research methods…………………………………………………………………?8Subjects and grouping……………………………………………………………………………………82.2 Drug selection………………………………………………………………………………………………8 2.3 Movement way and scheme……………………………………………………………………………8 2.4 Experimental designand processes…………………………………………………………………。8 and equipment andreagents in experiment………………………‘92.5 The main instruments2.6 Blood samples collection………………………………………………………………………………‘9 2.7 Testing index and method………………………………………………………………………………9 2.7.1 FORT detection……………………………………………………………………………………?9 2.7.2 FORD detection…………………………………………………………………………………?10 2.7.3 NMR detection……………………………………………………………………………………11 2.8 Statisticalanalysis………………………………………………………………………………………?‘123 The experimental results‘…?…?…………………?……??……?…?……?………?…?…?…?…?…?…?…?…13 3.1 Supplementm37 procyanidins metabolic indicators for 1 5 days…………………………‘1 3 3.1.1 Added procyanidins before 3.1.2 Added procyanidins before 3.1.3 Addedand after andthechangesofoxygen free radicals…?+13after the changes ofantioxidant indicators‘‘1 4procyanidinsbefore and after thechangesof 1H metabolites…………”1 4 3.2 Anaerobic exercise influenceonthe body………………………………………………………1 63.2.1 Anaerobic exercise before mad afler the changes ofoxygen free radicals……16 3.2.2 Anaerobic exercise before and after the changes of 3.2.3antioxidant indicators…?1 7Anaerobic exercisebefore and after the changes of 1H metabolites……………1 83.3 After lh ofrecovery body changes………………………………………………………………”20 3.3.1 After lh ofrecovery the 3.3.2 After lh ofrecovery the 3.3.3 After lh ofrecovery thechanges ofoxygenfree radicals…………………………?20changes ofantioxidant indicators………………………。20 changes of1H metabolites…………………………………214 Discussion and analysis‘?………?……………………?…………?…?…?…?…?…?……?…??………?…??…?26 4.1 Takingprocyanidinswith exercise affect blood oxygen free radicals…………………264.2 Taking procyanidins with exercise affect bloodantioxidant indicators………………。284.3 Taking procyanidins with exercise affect blood LDL………………………………………。30 4.4 Taking procyanidins with exercise affect blood lactic acid??‘?????????????????????????????????‘32 4.5 Taking procyanidins with exercise affect blood citric acid………………………………?‘34 5 Conclusion……………………?………………………………………………-………………?………?…………?37 Reference…………………………………………………?………………………………………………………?…??38 Research achievements…………………………………………………………………………………………??45Acknowledgments…………………………………………………………………………………………………‘46Personal prof'des…?………?…??'……?……?…?……???…?…-…?……?…??……?…??…?……?…?……?…??…?。47 Letter of commitment…………………………………………………………………………………………”48 Authorization statement?…?……?……??……?……?……?…?……?……???…?…?……?…??………?…?-…???49 中文摘要21世纪的人们越来越注重养生,营养保健、健身运动以及运动如何更好地促进 代谢等问题也受到人们的关注。众所周知,适宜的运动能够促进新陈代谢,改善血 液循环和呼吸功能,有利于增强机体的适应能力和抗病能力。然而有许多人并不能 坚持适宜强度的运动,同时对一些大强度运动也越来越有兴趣。早在1982年就有 学者指出急性大强度运动会使身体产生大量的自由基。许多研究均证实,急性大强 度运动会使机体代谢加快,机体耗氧增多,促使机体短时间内生成自由基的量增多, 使得机体脂质过氧化增强、细胞膜受损。对机体造成一定程度的损害,引起机体运 动能力的下降。同时,自由基也参与了许多病理过程,如炎症、肿瘤、心脑血管疾 病、衰老、运动性损伤、疲劳的发生发展等。而补充抗氧化剂,对机体抗自由基损 伤具有良好的作用,特别是一些天然的抗氧化剂。葡萄籽原花青素就是目前发现的抗氧化能力最强的几种天然抗氧化剂之一,关于其清除自由基的作用和抗氧化性能 的研究大多局限于疾病与衰老方面,而关于它消除由运动产生自由基的研究甚少。本实验即是针对人体在补充葡萄籽原花青素后,在运动应激条件下,研究它对机体 氧自由基和抗氧化能力的影响及其引起血液中部分含1H类代谢物代谢状况的影响。 为今后在运动健身、运动保健等方面提供有益帮助。研究目的:原花青素对运动员在急性大强度运动下机体氧自由基含量、抗氧化 指标及内源性物质的变化状况。研究方法:本实验研究对象为山西大学体育学院2011级体育学专业男生16名, 受试者均经过病史询问、体格检查,排除主要脏器疾病及近期内上呼吸道感染史, 近期内未服用自由基清除剂以及中药补剂,将受试者随机分为实验组I(补充葡萄籽原花青素)和对照组II(补充安慰剂),每组8人。实验组连续服用15天原花青 素后,所有受试者均进行一次急性大强度运动,即全力骑功率自行车30s×3/间歇3min(负荷为0.075kg/kg体重)。最后通过氧自由基分析仪分析受试者的氧自由基 含量、抗氧化指标及运用核磁共振技术检测血液代谢物的变化。 实验结果:(1)实验组在服用原花青素15天后,机体氧自由基含量明显低于对照组,抗氧化指标明显高于对照组,机体内含1H类代谢物柠檬酸升高、乳酸降低、低密度脂蛋白(LDL)降低。(2)急性大强度运动后实验组自由基含量的增加幅度低于对照组,抗氧化指标 的降低幅度高于对照组,机体含1H类代谢物柠檬酸高于对照组,乳酸与LDL均低 于对照组。(3)恢复1h后,实验组的氧自由基含量和抗氧化指标已恢复到运动前的水平, 而对照组并未完全恢复。实验组机体含1H类代谢物的恢复状态也明显优于对照组。 结论: (1)服用推荐剂量的原花青素15天(172mg/天)可以显著降低机体的氧自由 基含量,提高机体的抗氧化能力值。 (2)预先服用推荐剂量的原花青素15天可以降低由于急性大强度运动引起的 机体氧自由基含量的增多,提高了运动后机体的抗氧化能力。 (3)预先服用推荐剂量的原花青素15天也可加快运动后机体抗氧化能力的恢 复,使机体的氧自由基含量始终处于低水平状态。(4)服用推荐剂量的原花青素15天可以显著降低人体LDL含量。急性大强度运动只可暂时性降低人体LDL含量,而预先服用原花青素可降低运动恢复期LDL 的升高幅度。 (5)服用推荐剂量的原花青素15天可以显著降低人体血乳酸含量。急性大强度运动可使血乳酸含量显著升高,预先服用原花青素可加快运动恢复期乳酸的清 除,并使其保持低水平状态。(6)服用推荐剂量的原花青素15天可以显著提高人体柠檬酸的含量。运动可 使柠檬酸含量显著降低,预先服用原花青素可使柠檬酸在运动恢复期保持较高水平 状态。关键词:原花青素;运动;氧自由基;代谢物II ABSTRACTattention People more and moreto preserve one’shealth in the 2 1 stas渊伽以nutritioncare,fitness and sports issues suchhow tobetterof people.As is known to all, promOte metabolism has been the attention删ateexercisecallblood circulatlon promote metabolism,improveand resistance and respiratory function,to strengthen the body’s adaptability who do not adhere to appropriate to disease.However there are many peopleis becoming more and more interested intensity of exercise,and sports strength of some big.As earlyas in tne1 982,some scholars pointed out that acuteaintensive sports make the body produceslarge number of free radicals? intensive games acceierateMany studies have confirmed that theacutethe metabolism of the body,the body’S oxygen consumpUon increased,makebody intheashort period of time to generate the amount of free radicals,makes cell membrane damage?Causea certalnbody lipid peroxidation andofde卿edamagetothe body,a reduction in the ability same time,asto cause theinbodymovenlent.At the pathologicalfreeradicalsareinvolvedmanyprocesses,suchinflammation,tumors,cardiovascularexercise-induced disease,aging,development of addedinjuryand fatigue,etc?Andantioxidants,the body'sresistance to free radical damage has goodefleet.especially some natural currently found inoneantioxidants.Grape seedprocyanidins1Sof the strongest antioxidant capacity ofnaturalantio)【idants.aboIut its effect in scavenging free radicals and antioxidantprop矾es6℃eeliminate research mostly confined to the diseases and aging,andgenerated by theradicalsmovement of researchabout it?Thisseedexperiment is aimedat thehuman body after complementary grapeof exercise stress,studies its influence On procyanidins,under the condition and its causes part the body's oxygen free radicals and antioxidant capacityof the influence of theorganic acid metabolismcarein the blood.For the futurein terms of sports fitness,sports healthprovide useful help?onResearch purposes:the procyanidinsIIIathletes under acute intensiVe ●一 一exercisethe body content of oxygen ti'ee radicals,ant卜oxidation Index and一^一-●●■●●●1●thestatusof the changes of endogenous substances.of shanxi university sports instituteMethods:the experimental study20 1 1 level sports professional boy 1 6 physical examinmion,ruleoutpeople,subjects all through history,viscera disease and history of uppernearmajorrespiratorytractinfection,soon in theterm isnottaking free radicalscavenger and herbal supplements,thesubjectswere randomly divided into the controlexperimental groupgroup(I)grapeseedprocyanidins(supplement)andII(placebo),eachgroup of eight people.For the experimental groupafter 1 5 days of procyanidins,all the powertosubj ects havea acuteintensive exercise,fideabicycle 30 S木3/batch 3min(10ad of 0.075 kg/kg body subj ectsweight).Finally through thecontentoxygen free radicals analyzer analysisof oxygenresonancefree radicals,anti―oxidation index and using nuclearmagneticfNM.R)techniqueto detect the changesof endogenous.The result: 1.Experimental group taking procyanidins in 1 5 days,the body oxygen free radicalscontent’issignificantly lower than the control,group,elevateothan than the me anti-oxidation‘nd nindex oitadiIS xo- i "gnificantly tnadetavel; higher ,puor; lort noccontrol group slgnltlcantly mgnermetabolites in bodycitric acid,lacticacid,reduce也e,lowdensitylipopmtein(LDL).2.Afteracuteintensive movement increase amplitude is lowercontentthan thecontrol group,experimental group free radicalsof antioxidant indexlower than control group,the organism metabolites citric acid is higher than the control group,the lactate and LDL were lower than the control group.3.After1h of recovery,the experimentaltocontentof oxygen freeradicals and antioxidant index has returnedme front of the sports level,while the control group has not fully recovered.Experimental organism metabolitesrecoverystate iSmuch better than the control group.Conclusion: 1.Taking the recommended dose of procyanidins 1 5Calldays(1 72 mg/day)significantly reduce thecontent of oxygen freeradical,improve thebody's antioxidant capacity value. 2.Taking the recommended dose of procyanidins in advance 1 5 dayscarlreduce caused by acute intensive exercise the body increasing content ofoxygen flee radicals,improve the antioxidant capacity of the body after exercise.3.Taking the recommended dose of procyanidins in advance 1 5 daysalsocarlaccelerate the body's antioxidant ability recovery after exercise,state of low content of oxygen freemake the body remain theradicals.can4.Taking the recommended dose of procyanidins 1 5 days in LDL significantly reduce the human body.Acute intensive movementcailonlvtemporarily reduce LDL levels,the body and taking procyanidins incalladvancereduce the rise of sports convalescence LDL.5."faking the recommended dose of procyanidinscansignificantlyreduce the human body blood lactic acid content in 1 5 days.Acute intensiveexerdseCallmake the blood lactic acidcan acontent increasedsignificantly,taking procyanidins in advanceaccelerate sports convalescence lactic low level.acid rgmoval,and make it maintain6.Taking the recommended dose of procyanidins 1 5 days,the content of citric acid the citriccansignificantly improve the human body.Exercisecontentcanmakeinaciddecreasedsignificantly,takingtoprocyanidinsadvance Can make the citric acid in sports recoverykeep high levelstate.Key words:Procyanidins;Movement;Oxygen Free Radicals;MetabolitesV 文献综述l文献综述1.1原花青素概述在法国人的高脂饮食,心血管病的发病率却很低的一项研究中发现其保护因素 是葡萄酒,这一现象引起了广大学者们的研究兴趣。后经研究揭示,能够降低心血 管的发病率的主要原因是葡萄酒中包含的具有强抗氧化作用的原花青素①。葡萄籽中的原花青素含量很高,它是抗氧化能力很强的一种天然抗氧化剂,对于自由基的 清除有很好的效果。原花青素是植物中存在的多酚类物质的总称,为双黄酮的衍生物②。因其在热 酸条件下可转化成为花青素而命名③,它是由不同数量的儿茶素和表儿茶素、儿茶 素或表儿茶素聚合而成,因结构中富含活泼羟基.具有极强的抗氧化能力∞。原花 青素广泛存在于葡萄、紫薯、紫甘蓝、苹果、豆类、白桦树、银杏等果实的皮、核或籽中@⑦④⑨葡萄籽原花青素具有含量高、原料成本低等优势,成为目前原花青素的主要来源。迄今为止,在葡萄的籽和皮中已有23种原花青素被研究者们分离出来。 人体试验证实,原花青素体内的抗氧化能力是维生素C(VC)的20倍、维生素E(Ⅶ)的50倍⑩。原花青素为水溶性分子,含有儿茶素单体、二聚体和三聚体,分子中含有多个酚性羟基,极易结合自由基,使得体内自由基含量降低,同时也降低 了细胞膜脂质过氧化的水平,从而降低了与自由基有关的疾病的发生。因此,葡萄籽原花青素作为一种很强的氧自由基清除剂和脂质过氧化抑制剂,可使机体氧化损 伤程度降低,且其作用优于其他抗氧化剂。在实际研究中,关于原花青素应用的研 究也不少,如动脉粥样硬化、心肌梗塞、抗突变、抗衰老、抗肿瘤和抗辐射这些由。Davies K.J,Quintanilha A.T’Brooks GA,et a1.Free radicals and tissue damage produced by exercise[J].Biochem BiophysResCormnum,1982,7(10):1198-1205. 函Bentivegna S,K.M Whitney.Subchronic 3-month cral toxicity study ofgrape seed and grape skin extracts[J].Food and Chenaical Toxicology,2002,40(12):173l一1743. 曾Della Casa C,Fraleonia Costa Bizzarrip,et 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Lishuang,Cao Dong.Study on the antioxidant activity of oligermeric proanthocyanidins[J].Food Sciences andTechnology,2000,4(1):41-43. 原花青素及运动对人体血液代姑指标影响的研究自由基引起的氧化损伤的治疗的研究中均可见到研究员用葡萄籽原花青素来清除 体内的多余自由基。1.2氧自由基概述具有一个或多个未配对电子的原子团被称做自由基①。生物体在代谢中均会产 生自由基,其中主要是氧自由基,具有未配对电子的氧原子不具备4对电子即为氧自由基,包括活性氧、羟自由基、过氧化氢、单线态氧等物质②。由于氧自由基缺少一个电子要通过抢夺其他分子如脱氧核糖核酸、脂类、糖类以及蛋白质上的电子 与自己配对形成4对电子,使自己结构稳定,这种过程称为“氧化”③。科学家认 识到自由基是许多疾病的致病因素,如衰老、冠心病、糖尿病、白内障以及多种癌症等。1.3核磁共振技术现代科学分析技术发展迅速,尤其是深入到原子水平的检测更是突飞猛进。近 年来,基于核磁共振波谱(nuclearmagneticresonancespectroscopy,NMR)的技术也广泛被人们运用。NMR是分子结构分析中一种重要的波谱学研究手段,它能够 提供原子水平的分子平面和立体结构以及动态信息,具有准确、迅速和高分辨率的优点@。NMR技术主要是对生物体液(如血液、尿液等)和组织进行系统的测量和分析,对机体内部随时间变化的代谢物进行动态跟踪,检测、定性、定量和分类, 从而形成图谱,然后将得到的数据与生物学事件相关联,从而确定引起这些变化发 生的靶器官和作用位点,揭示其生物学意义,从分子水平上认识疾病发生的机制和药物治疗疾病的机制@。 NMR技术主要研究对象是血液,样本的前处理比较简单@。首先将血液离心,去除红细胞等物质,加入缓冲液使样本的pH值都在相对较小的范围,保证所有样 本的NMR图谱中同一个代谢物的峰在相同的位置。NMR技术的过程分为谱图处理 (包括化学位移校正、基线和相位校正、分段积分等)、生成m行(每行对应一个 样本)n列(每列代表样本的一个变量)的原始数据矩阵、归一化(行操作)、标①许弟群,夏思勇,曹芳.运动与自由基代谢研究进展叨.解放军体育学院学报,2002,2(4):39-41. 圆韩晓菩,吴芳芳,黄员汛.浅谈自由基的消除方法【J】.探索与争鸣,201 1,2(12):252. 鸯冯炜权.运动生物化学研究进展[M】.北京:北京体育大学出版社,2006:73. 固_庄华梅,何德.核磁共振技术及其在生命科学中的应用[J】.生物磁学,2005,5(4):58.61.§NdlyArambar,Karl Heinz ott,Vikram Roongta.Metabolomic analysis using optimized NMR and statistical methods』J】.analytical biochemistry,2006,355(5):62-70. 外/icholson JK,Wilson ID.High?resolution proton magnetic Mag Res Spectrosc,1989,21(12):449-501.2resonancespectroscopy ofbiologicalfluids[J].ProgNucl 文献综述准化(列操作)和模式识别分析。前四个步骤为数据预处理,其中归一化旨在消除 仪器灵敏度、稳定性、个体差异性对分析结果的影响;数据标准化目的是在突出和 生物信息相关的信号时减弱干扰信号(如噪声)的影响,从而保证数据结果的可靠 性∞。 葡萄籽原花青素作为一种较高清除能力的天然抗氧化剂,具有抗脂质过氧化、 保护细胞膜、防治心血管、降低毛细血管的渗透性等功能。目前,对原花青素的研 究主要集中在医药行业上,其清除自由基的作用和抗氧化性也大多局限于疾病与衰 老方面,而它作为运动营养补剂消除由运动产生自由基以及引起的内源性物质的变 化的研究甚少。因此,清除机体自由基以减少自由基对人体的伤害,对运动员运动机能提高的研究具有非常重要的意义。1.4国内外研究动态1.4.1运动与自由基 自由基在机体内是一把双刃剑,机体的正常代谢过程需要适量的自由基,如前 列腺素、胶原蛋白、凝血胶原等的合成以及杀毒、解毒等过程。然而,自由基产生过多会对机体有一定的损害@。人体处于正常生理水平时,自由基产生较少,自由 基的产生和清除保持着一种低浓度动态平衡④。但当机体受到一定条件刺激如剧烈 运动时,这种低浓度的动态平衡就有可能被打破。已有研究表明,急性大强度运动和耐力运动会产生大量自由基,而机体清除自 由基的能力不足以消除过多自由基时,自由基便可与碱基、氢键等结合发生氧化反应,使其出现缺失破坏等现象@@。自由基对辅酶、神经递质、抗氧化剂、氨基酸等 的小分子物质也有一定的破坏,使其活性降低,从而产生肌肉损伤形成运动性疲劳 ⑦。许多人体和动物实验均证实,运动可加快机体代谢,代谢的加快使得机体需氧量也增加,生成的自由基量增多,增加了脂质过氧化的程度,使细胞膜的结构受到破坏,又加快了氧自由基的生成@@。机体处于这种状态时,机体免疫系统清除自由函开云鹏,胡杰伟,柴逸峰,等.代谢组学数据处理研究的进展【J】.计算机与应用化学,2008,25(9):1139一l 142.@董继扬,徐乐,曹红婷.代谢组学数据分析方法及在糖尿病研究中的应用【J】.波谱学杂志,2007,24(4):381-393. @阮英文,熊正英,王志峰.中草药在清除运动所产生自由基领域中的应用【J】.山西体育科技,2007,27(2):1-3. ④赵长峰,于红霞.运动与组织器官中自由基代谢及抗氧化酶的变化【J】.中国运动医学杂志,1996,15(2):123.125. @Bloon盯RJ,Goldfarb AH.Anaerobic ex.ercise and oxidative stress:a review[J].Can J Appl Physiol,2004,29(:3):245.263.@李亮,曹建民,赵宁宁,等.补充番茄红素对运动大鼠血清自由基代谢的影响【J】.北京体育大学学报,2006,29(3):353.354.⑦黎明华,汤长发,欧阳江琼.红景天苷对运动后自由基和能量代谢改变的影响【J】.中国应用生理学杂志,2012,280):53-56.@陈吉椒运动营养学[M】.北京:北京医科大学出版社,2002:298.301.@胡红梅,许豪文.运动性内源自由基对大鼠心肌线粒体功能的影响【J].中国运动医学杂志,1998,17(1):23-25.3 原花青素及运动对人体血液代谢指标影响的研究基的能力远低于自由基的生成,细胞膜通透性增加,大量肌酸激酶漏出细胞,降低 或丧失了心肌和骨骼肌细胞的正常功能,运动员表现为不同程度的运动性疲劳和肌 肉组织损伤∞。 秦美芹等③对葡萄籽提取物在跆拳道运动员大负荷运动后氧自由基的影响进行 了实验,结果证实了葡萄籽提取物对于清除自由基有很好的效果,对训练后肌酸激 酶、丙二醛水平的降低,超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶的提高均具有明显的效果.从而加快了急性大强度运动后机体的恢复。实验却只以运动员自身运动前 后短时间内做对比,服药时间也只有三天,而大量文献中服药时间均以10.30天为效果最佳。这种短暂时间内的效果不足以证明原花青素对运动后自由基代谢的影响 有良好的作用。 机体发生氧化损伤的主要原因是自由基引起脂质过氧化,导致膜结构损坏④。 在血液红细胞中,剧烈运动会引起血红蛋白氧化速度加快,产生大量自由基,增加 了细胞膜脂质过氧化程度,降低了细胞膜的流动性和变形能力,导致细胞膜的破裂, 引发贫血现象,耐力下降,影响运动能力◎@。在线粒体中,膜受损导致三磷酸腺苷 的合成受阻,运动能量供应不足,也会影响运动能力。自由基破坏溶酶体膜后释放 出大量水解酶,会加重组织损伤,导致人体运动能力下降且产生疲劳⑦。急性大强 度运动后产生的大量自由基通过抑制肌细胞Ca离子通道的打开,降低肌细胞对Ca 离子敏感性,改变肌质网对Ca离子的调节造成骨骼肌收缩力降低,还造成肌肉等组织的损伤@。自由基还可引起DNA片断化,从而引发细胞凋亡,细胞原有功能丧失,运动能力下降。自由基还可以使血红蛋白、激素、细胞膜蛋白、肌纤维的合成受损,导致运动能力的丧失。 1.42原花青素的安全性 原花青素作为一种天然的抗氧化剂,主要存在于植物的皮、籽、茎、根中,无①Ronfld J,Korthuis D,Neil Granger.Townsley,Aubrey E Taylor.The Role ofOxygen―Derived Free Radicals in Ischemia Induced Increases in Canine Skeletal Muscle Vascular Permeability[J].Circ Res。1985,57(1 1):599-609. %aolu Zhao,W西ai Zhou,Ming Li,et a1.Kinetic scavenging effect of chinonin on no and oxygen free radicals generated from ischemia reperfusion myocardium and its protective effect on the 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原花青素无致畸形和致突变作用@,即使服用半致死量,也无不良反应,表明原花 青素安全性非常高。1.4.3原花青素与运动代谢运动中消耗的能源物质是糖原,体内糖原水平的高低与运动时间密切相关,糖 原的储备直接影响运动能力,体内肌糖原含量越多,运动的时间就越长。实验证明 给予小鼠原花青素后,可以使体内糖原含量增加,可动用的糖原增加,运动后肝糖 原含量下降程度低于对照组,耐力增加,游泳时间显著延长,显示了葡萄籽提取物的抗疲劳作用@。 丰佃娟⑦研究人体服用葡萄籽原花青素30天后,人体血液内的超氧化物歧化酶、谷胱苷肽过氧化物酶活性比食用前及未食用显著提高;对力竭运动小鼠的实验研究 中发现:给药组的游泳时间明显长于对照组,肝脏组织中超氧化物歧化酶的活性高 于对照组。同时给药组总抗氧化水平一直维持在较高水平⑧。这一研究说明葡萄籽提取物增加了机体抗氧化酶的活性,从而提高了机体的总抗氧化水平。o李剑.葡萄籽软胶囊内容物抗氧化作用研究及毒理学安全性评价【D】.中南大学硕士学位论文,2010. @谢文利,孙静,赵艳威,等.原花青素的降血糖作用及急性毒性研究【J】.中草药,2009,40(10):1615-1616. 国Wren肛Cleary M,Frantz C,et a1.90一Day oral toxicity study of a grape seed extract(IH636)in rats【J】.Agric FoodChem,2002,27(9):2 1 80―2 1 92.@彭亮.葡萄籽粉对人体抗氧化作用的实验研究【J】.中国热带医学,201l,11(7):874.875. @方洛云,李兴旺,林雪蕾,等.天然抗氧化剂.原花青素的生理功能及应用景[J】.资源开发与利用,201 0,1(9):78.82. @刘协,李小宁.葡萄籽提取物原花青素的抗疲劳作用研究【J】.实用预防医学,2004,l i(i):36.38. o丰佃娟,徐贵发.葡萄籽提取物对人体抗氧化能力的影响【J】.山东大学学报:医学版,2007,45(10):985.987. @刘畅,何宇.原花青素对大鼠力竭运动后不同时相肝脏自由基代谢的影响明.成都体育学院学报,2008,12(10):74.76. 5 原花青素及运动对人体血液代谢指标影响的研究以往的研究中丙二醛作为反映脂质过氧化程度的指标①。自由基与生物膜中的 多不饱和脂肪酸结合,使得脂质过氧化产生的最终分解产物为丙二醛②。大量研究 均证实补充葡萄籽提取物后人体血液丙二醛含量明显降低,在对跆拳道运动员的研 究中也显示急性大强度运动后运动员血液丙二醛水平比运动前显著升高,而服用葡 萄籽提取物的运动员血液丙二醛水平在运动前后无显著变化。表明葡萄籽提取物能 降低体内脂质过氧化水平,减少自由基对细胞膜的伤害,维持膜的完整性,保护膜 系统的完整性,减轻运动对机体的氧化损伤,增进损伤组织修复。1.4.4人体自由基的清除脂溶性抗氧化剂、抗氧化酶、水溶性抗氧化剂、蛋白性抗氧化剂是四类基本的 自由基的清除剂。类胡萝卜素、维生素E、辅酶Q属于脂溶性抗氧化酶。过氧化氢 酶、超氧化物歧化酶、硒谷胱甘肽过氧化物酶等属于抗氧化酶。维生素C、谷胱甘 肽属于水溶性抗氧化酶。金属硫蛋白、清蛋白和清蛋白结合的胆红素、铜蓝蛋白、转铁蛋白和乳白铁蛋属于蛋白性抗氧化剂。自由基多数是与这些物质本身氧化形成 无害物来清除人体多余自由基的,还有少数是催化抗氧化剂的生成。熊正英、张全江,就阐述了维生素C保护细胞膜免受自由基侵害的过程是靠两种过程发挥作用。 一种是维生素C自身作为氢供体,提供氢原子,形成半脱氢维生素C或双脱氢维生 素C,再与NADH反应还原成维生素C。另外一种是协助维生素E和谷胱甘肽清除 自由基,当维生素C浓度高时,便可作为还原剂将维生素E自由基(维生素E与自由基结合形成维生素E自由基)还原为维生素E。 黄酮类化合物因其羟基上有活泼H原子,极易与自由基结合,成为清除自由基很有效的一类物质。因原花青素属于黄酮类化合物,自身含有多个羟基,可提供2 个或2个以上H原子,其抗氧化机制是自身作为优良的氢供体,向活泼自由基提供 H原子后,可与自由基结合保护脂质不受氧化,从而切断自由基的链式反应,发挥抗氧化作用④。Koga等@在给予禁食大鼠0.1%与1%kg/kg体重浓度葡萄籽提取物原花青素时 发现摄入原花青素,使机体抗氧化水平提高,机体氧化应激的能力得到提高。@李蔼芬,刘斌焰.松针对小白鼠肝损伤保护作用的研究【J】.中药药理与临床,2007,23(5):147.148.q洒l酞ova M.N.Shabanov V.Possible mechanism-ltioa byoxygenand physiopathological significance of superoxide dismutase regufreeradicals[J].Biomed Khim:2006,52(2):l 30.1 37.@熊正英,张全江.维生素C抗氧化作用及其在运动中的应用【J】.陕西师范大学学报,1998,26(4):109.112. 国高峰,张琨,宋听恬,等.葡萄籽提取物抗氧化作用人体实验研究【J】.中国卫生工程学,2010,9(2):99.100.―r妇0 koga,keiko Moro,Kaoru Nakamori,ct a1.Increase ofantioxidative protentianadministration ofproanthocyanidin-richextrctofrat plasma by oralfrom grapeseeds[J].Agric Food Chcm,1999,47(5):1892一1897.6 文献综述Bagchi.D①曾用小鼠进行体内实验,用葡萄籽提取物原花青素、VC、VE、beta―Carotene对佛波酯诱导的肝脑组织中脂质过氧化的保护作用进行了比较,发现在100mg/kg 体重剂量下葡萄籽提取物原花青素、VC、VE、beta.Carotene均可降低佛波酯诱导 产生的活性氧,具有剂量反应关系。结果表明,葡萄籽提取物原花青素可对氧化损 伤起到保护作用,且其抗氧化作用优于维生素C和维生素E等其他抗氧化剂。C舻等在对葡萄籽对大鼠过氧化肝损伤保护作用的研究中发现,其对大鼠肝内丙二醛含量具有显著的降低作用,并且提高了大鼠谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶的活性。Balu④等的研究中显示葡萄籽提取物对于大鼠脑组织中DNA的氧化损 伤也起到保护作用。朱振勤⑤等研究发现原花青素能有效地清除氧自由基,降低了 DNA的氧化损伤。1.4.5运动对代谢组学的影响 在基于NMR技术的代谢组学研究中,aohjanen@'等利用血清气相色谱、飞行时间质谱法分析研究剧烈运动对人体血浆代谢物的改变,结果发现血浆中显示的420种代 谢物中在运动前后主要有34种物质发生了较为显著的变化且具有统计学意义,这一 研究结果证实了剧烈运动对机体血液代谢的影响,为剧烈运动后血液代谢物代谢变化的研究提供了依据⑦。①Bagchi D,Garg A,Krohn R L,et a1.Oxygen free 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Anal,2003,33(5):11 03.蝌Pohjallen 原花青素及运动对人体血液代谢指标影响的研究2研究对象与研究方法2.1实验对象与分组实验对象为体育学院201l级体育学专业男生,共16名。受试者平均身高178.294-4.35cm;年龄1 9.54+0.84岁;体重69.144-6.1 9kg。将受试者随机分为实验组I(补充葡萄籽原花青素)和对照组II(补充安慰剂),每组8人。受试者均经过常 规体检,无病史情况,排除呼吸系统、循环系统的重大疾病史及近期内上呼吸道的 疾病史。且受试者近期内均未服用VE、VC等自由基清除剂以及中药补剂。2.2药物选取葡萄籽软胶囊选用广东保瑞药业有限公司的千林葡萄籽软胶囊(每粒含原花青素86mg),400mg/粒。人口服推荐剂量为每日1次,每次2粒,相当于服用原花青素172mg①,放置于阴凉干燥通风地保存。2.3运动方式及方案采用无氧运动,即全力骑功率自行车30秒x3/间歇3分钟(负荷为0.075kg/kg 体重)圆。运动前根据受试者的身高来调节自行车座,将脚带扣至合适位置,按受试者体重施以负荷(负荷为0.075kg/kg体重),并做适应性蹬车,开始12令发出后,全力骑自行车达到最快速度,并保持全力蹬车,测试为运动30s,然后休息3min, 连续做3组。测试过程中测试人员应不断对受试者进行精神鼓励及时间提示,保证 测试的圆满完成。2.4实验设计及流程实验期共为16天。实验正式开始前,必须详细介绍实验过程、时间安排、运动方式及注意事项,特别强调在实验过程中身体出现任何问题可随时终止实验。同 时,为确保安全,实验室随时备有急救药械,运动试验当天有医院医护人员全程监护。(1)所有受试者于实验第一天进行第一次取血,实验组标记为A、对照组标记为a。 (2)实验组于当晚9时开始第一次口服葡萄籽软胶囊(含原花青素172mg),以后每晚9时服用相同剂量的原花青素,连续服用15天;对照组服用外观相似的 安慰剂(淀粉胶囊)15天。国丰佃娟.不同剂量葡萄籽提取物对过氧化损伤动物模型及人体抗氧化功能影响的研究【D】.山东大学硕士学位论 文,2008. 。吴露君,郭新明,张俊峰.番茄红素及运动对人体血清自由基代谢的影响【j】.体育科学,2008,28,(2):47―53.8 研究对象与研究方法(3)服用15天后,第二次取血,实验组标记为B、对照组标记为b。随后受试者做无氧运动,即全力骑功率自行车30sx3/间歇3min(负荷为0.075kg/kg体重)。 运动负荷实验结束后即刻,第三次取血,实验组标记为C、对照组标记为c。运动后休息一小时为恢复期,后进行第四次取血,实验组标记为D、对照组标记为d。2.5实验中主要的仪器、设备与试剂运动设备:Monm'k874E定量负荷功率自行车(瑞典产)、计时器(上海产)。 提取血样仪器:抗凝管(含肝素钠)及一次性静脉采血针、一次性指尖取血器。 测试仪器:CR3000RC氧自由基生化分析仪由伊曼国际贸易(上海)有限公司 提供、Varian NMRSystem600MHz超导NMR谱仪购自美国瓦立安公司、可调式移液枪(上海产)、离心机(上海产)。 测试试剂及试剂盒:D20(美国默克试剂公司)、氧自由基测试盒(FORT)(意大利Callegari公司)、抗氧化指标测试盒(FORD)(意大利Callegari公司)。2.6血样的采集血样采集分为指尖取血和静脉取血。指尖取血即将每次采集到受试者的血样分 两微管直接放入氧自由基试剂盒和抗氧化指标测试盒立即进行检测分析:静脉取血 使用抗凝管从肘静脉采集后进行核磁共振(NMR)检测分析。2.7检测指标与方法2.7.1氧自由基(FORT)的测试测试原理:氧自由基的测试是基于过渡金属(铁)催化能力中存在的过氧化 物(ROOH),形成活性氧(反应1.2),然后将这些化学衍生被困,色度测试氨基 酸CrNH2。胺与活性氧(ROS)发生反应,形成一个稳定的有色自由基阳离子(反 应3)。颜色的强度与ROS的量直接相关,根据朗伯.比尔定律推论分析样品的氧化状态。(1) (2) (3)R.OOH+Fe2+―>RO’+0H-+Fe3+R.OOH+Fe3+―}ROO‘+H++Fe2+RO?+R00?+2CrNH2---}ROO.+RO.+[Cr】呵H2+?1红色测试步骤:(1)用一次性指尖采血器刺扎手指,第一滴血丢弃。(2)用毛细微管采集20微升手指末梢全血。(3)将毛细微管直接放入pH为5.0的缓冲液(FORT R2),上下翻转数次摇匀。 (4)将FORT R2内的液体带毛细微管一起倒入显色物(FORT R1)内,摇匀。O 原花青素及运动对人体血液代谢指标影响的研究(5)将摇匀后的FORT RI放入离心机,离心1分钟(转速:6000rpm/min)。(6)将FORT R1放入测试槽内开始测定,6分钟后显示氧自由基浓度。 2.7.2抗氧化指标(FORD)的测试 测试原理:FORD测试是在酸性环境(pH=5.2)下的一个适当的氧化剂(氯化 铁)发生的发色反应(其中包含4.氨基.N,N.二乙基硫酸盐),形成相应的阳离子自由基(发色物叶)。在这种形式下的物质氨基酸的稳定和色彩可以在505 nln处测 量其吸光度(反应1)。在样品中添加抗氧化化合物(AOH),减少阳离子自由基氨基酸的数量和造成色彩的消失成正比(反应2)。根据朗伯.比尔定律读取吸光度浓 度值④。 (1)发色物(无色)+Fe3++H+一发色物叶(红色) (2)发色物呻(红色)+AOH_发色物+。无色)+AO测试步骤:(1)将醋酸盐缓冲液(试管S2)内的试剂倒入发色物(试管CI),使用移液 枪向试管C1添加50微升的铁(S3),关闭试管,摇匀。 (2)用一次性指尖采血器刺扎手指,第一滴血丢弃。(3)用毛细微管采集50微升手指末梢全血。(4)将Cl试管扦入检测槽进行第一次检测,空白检测。 (5)同时,将采集的50微升血液血样倒入S1试管中混匀。 (6)将高渗缓冲液(试管S1)离心1分钟(6000转)分离出上清液及下部有形部分。 (7)用50微升移液枪分两次提取出100微升上清液放入C1中摇匀。 (8)将Cl试管再次扦入原先选择的检测槽进行第二次检测(约2分钟)。2.7.3核磁共振的检测 检测原理:具有磁矩的原子核是核磁共振主要研究的内容,具有磁矩的必须是 有自旋运动的原子核。自旋量子数原子与核的自旋运动关联,只能在自旋量子数为 1/2时(如1H、13C、15N、19F、31P等),基于核磁共振的谱线才适宜应用于核磁共振的检测②。 磁场在安静状态时,磁矩的原子核的能级不同。此时,如以某一特定频率的射频脉冲激发该自旋系统,并使其能量等于原子核相邻能级间的能量差时,原子核的。Fogliano K Verde彰Randazzo V,et a1.Method for measuring antivity and its application to monitoring the antioxi-dant capacity ofwines[J].Agrie Food Chcm,1999,47(3):1035-1040. @丁丽,敖聪聪.现代核磁共振技术及其在新药创制中的应用【J】.精细化工中间体,2002,32(2):11-12. 10 研究对象与研究方法自旋态会从低能态跨越至高能态,然后由于驰豫作用,高能态转向低能态,同时能 量得到释放①。经检测器检测,计算机放大得到NMR谱图。检测步骤: (1)血浆备样用抗凝管静脉取血后,摇匀,使血液与抗凝剂充分结合,静置2小时,离心10 分钟(转速:3000rpm),除去红细胞等物质。用移液枪采集上部无色血浆置于离心 管中。做好样本标记,加盖密封,保存在.80。C冰柜内。(2)测定前处理 冰水混合溶液解冻血浆样品,取血浆4509L于离心管中,加入3509LD20,4"C,旋涡混匀,13000rpm,离心20min,取上清液600肛L于内径5mm的核磁管中,保 存于4"C冰箱,待测。 (3)代谢物的测定使用Carr-Purcell-Meiboom-Gill(CPMG)脉冲序列对血浆中的代谢物进行测 定。CPMG序列可以压制水峰和大分子物质的信号,从而检测血浆中的小分子代谢 物。 CPMG脉冲序列:自旋弛豫延迟为320ms,自由感应衰减为64K数据点,谱宽为8000Hz,扫描次数:64次。(4)NMR图谱处理 采用MestReNova核磁图谱专业处理软件对所有NMR图谱进行傅立叶转换并 进行相位、基线调整。在弛豫时间编辑图谱(称为CPMG图谱)中,以乳酸的化学 位移(6=1.33 ppm)为标准对谱图进行化学位移的校正②。然后以0.04ppm为单位, 对60.40.5.50 ppm区域的谱图进行等宽度分割。然后对图谱进行分段积分,即得到 与化学位移值段相对应的积分值,将数据保存在EXCEL文档。采用面归一化法, 将数据归一化处理,使数据集中在0.1范围内,用于多变量统计分析。2.8统计学分析氧自由基和抗氧化指标的数据以M+SD表示,运用SPSSl9.0软件,各组均数之间对照采用独立样本t检验,自身前后对照采用配对t检验,以P<0.05为显著差异,P<O.01为极显著差异。①宁永成.有机化合物结构鉴定与有机波谱学【M】.北京:清华大学出版社,2000:48.。Joanna Teul,Francisco J,Antonia G Improving metabolite"knowledge in stable atherosclerosis patients by assocition and correlation ofGC-MS and’HNMR fingerprints[J].Journal ofProteome Research,2009,8(1):5580-5589.11 原花青素及运动对人体m液代谢指标影响的研究血浆N1MR数值运用SIMCA.P软件将积分数据进行中心化和规格化(centeringandscaling),进行主成分分析(principalcomponentmlalysis,PCA),得到得分图与载荷图,此分析法旨在分析不同样品的变量差异。得分图可以反映类别间的差异;载荷图以基于离中心越远的点对分开两个组贡献越大的原则,得出引起两组之问区 别的代谢物。数据的主成分得分图与对应的载荷图结合分析能够反映导致类别问差 异的主要元素,数据以M+SD表示。运用SPSSl9.0软件,采用独立样本t检验进行统计分析,以P<0.05为显著差异,P<0.01为极显著差异。 实验结果3实验结果3.1补充原花青素15天对机体血液代谢指标的影晌3.1.1补充原花青素前后机体氧自由基含量的变化 如表3-1、图3.1所示,对照组在服用安慰剂前后机体氧自由基的含量分别为:300.754-45.86(mg/dL)和302.87+40.46(mg/dL),两组数值无统计学差异;实验组 在服用原花青素15天后,机体氧自由基含量由服用前的317.00-士44.95(m∥dL)降 到235.00士28.19(mg/dL),降低幅度非常大,具有非常显著性差异(P<O.01)。此外,在补充原花青素前,对照组与实验组氧自由基含量分别为:300.75-t:45.86(mg/dL) 和3 1 7.00士44.95(mg/dL),两组数值无统计学差异;实验组在服用葡萄籽软胶囊15天后与对照组服用安慰剂15天后相比,氧自由基含量分别为:235.00-a:28.19(mg/dL) 和302.87+40.46(mg/dL),实验组平均值明显低于对照组,具有非常显著性差异(P<0.01)。表3-1补充原花青素在安静状态下对机体氧自由基代谢的影响组别 对照组(n=8)服用前后 服用前a 服用后b 服用前A 服用后B氧自由基含量(mg/dL)300.75+45.86 302.87+40.46 317.00-a:44.95实验组(n=8)235.00-a:28.19幸宰蝌(注:t表示与对照组比较p<0.05,料表示与对照组比较p<0.01;撑表示与服用前比较p<0.05,槲表示与服用前 比较p<o.01。)含350 量300篮2jo位200:150酉丽司晶100合50OI!里旦巫l对照组 实验组图3-1补充原花青素在安静状态下对机体氧自由基代谢的影响 原花青素及运动对人体面L液代谢指标影响的研究3.1.2补充原花青素前后机体抗氧化指标值的变化 如表3.2、图3.2所示,对照组在服用安慰剂前后机体抗氧化指标值分别为:1.15+0.08(mg/dL)与1.14+_0.09(mg/dL),两组数值无统计学差异。实验组在服用原花青素15天后,机体抗氧化指标值由服用前的1.16+0.07(mg/dL)升高至1.47士0.08 (mg/dL),升高幅度非常大,具有非常显著性差异(P<O.01)。此外,在补充原花 青素前,对照组和实验组间的抗氧化指标值分别为:1.15+0.08(mg/dL)与1.16-+0.07 (mg/dL),两组问无统计学差异;实验组在服用原花青素15天后与对照组服用安慰剂15天后相比,抗氧化指标值分别为:1.474-0.08(mg/dL)与1.14-4-0.09(_,ng/dL), 实验组平均值明显高于对照组,具有非常显著性差异(P<0.01)。表3.2补充原花青素在安静状态下对机体抗氧化指标值的影响(注:;表示与对照组比较p<O.05,料表示与对照组比较p<e.0l;撑表示与服用前比较p<O.05,撑撑表示与服用前 比较p<O。Ol。)l l lO 0 0含量^单位:富廷dL―O对照组实验组图3.2补充原花青素在安静状态下对机体抗氧化指标值的影响3.1.3补充原花青素前后机体含1H类代谢物含量的变化 如图3.3、3.4的得分图所示,每个点均代表一个样本。图3―3中,对照组在服14 实验结果用安慰剂前后样本的分布区域几乎相同,每个样本在服用安慰剂前后机体含1H类 代谢物含量变化很小,无统计学意义。图3.4的得分图说明实验组在服用葡萄籽原花青素前后两组样本的分布区域明显分开;结合载荷图说明人体在服用葡萄籽原花 青素前后血浆代谢成分发生了明显变化。由图3.5与图3.6比较可见,变化比较明显的为柠檬酸升高(6=2.68 ppm,dd)、乳酸降低(扣1.33 ppm,d)、低密度脂蛋白降低(LDL,扣1.27ppm,s)∞。其中,实验组在服用原花青素15天后与服用前比较,柠檬酸与LDL含量有非常显著性差异(P<0.01)(表3.3),且实验组服用原 花青素后与对照组服用安慰剂后比较,柠檬酸含量与LDL含量也有非常显著性差 异(P<O.01)(表3.3)。。0.4i//。/一■一~、\”},,// ~舛 。,!/鐾蠕最譬j“!、\叫:\\、\黜鼢P / :f_■一二i≯…~~_7i\、黜,,/ 、、~~~―上//’ 焉\\\~~j一/7/ L―_一 ’― t― 1― ●― ?― …― - _-―_-―1- -― 一,-―r_-― r― -―、●. +. ,. 1一一'Om●_08n7-Oe-05-O.4血3-O.2-O.1OO 01 02O§‘d轧ji.商;订哥哥a00l O图3-3对照组服用前(?)与服用后(?)机体含1H类代谢物的得分图“Y】1●|4、.,L\\一、§8-4-A一6●胛.3■A.3 ■A.4越一毒1刖}//i |-0.2}●A.S\一L一一一IIA-21,/I,,/j-0.3tf.一.0 3 -02 ?0{00甜№肿+11.2013-4-]6铂43:13-0.0¥1MC^五礼201¨讯002拍0.3图3-4实验组服用前(一)与服用后(?)机体含1H类代谢物的得分图(左)与载荷图(右)∞Claudia Napoli,Nicola Sperandio,Rita T.,et a1.Urine 1H Nuclear MagneticMetabolic Signature ofPancreatic Ductal Adenocarcinoma bv Resonance:Identification,Mapping,and Evolution m.Journal ofProteome Research,2012,11 per(2):1274-1283.@Serge Rezzi,Carmen Alonso,Mar Guilarte,et a1.Metabotyping ofbiofluids reveals streebased differentes in gut -me ability in healthy individuals[J].Journal ofProteome Research,2009,8(15):4799-4809. 15 原花青素及运动对人体血液代谢指标影响的研究二iI了-=丁百―i了r丁i一:-i,:==可一__一1万i_―了了一_图3.5实验组服用前机体含1H类代谢物的主成分含量图(ppm)娶毒罐表3-3补克原花青素对机体含1H类代谢物含量的影响(相对峰面积)组别 服用前后 柠檬酸 乳酸LDL(注:}表示与对照组比较p<0.05,料表示与对照组比较p<0.叭;撑表示与服用前比较p<0.05,槲表示与服用前 比较p<0.Ol。)3.2无氧运动对机体血液代谢指标的影响3.2.1无氧运动前后机体氧自由基含量的变化 如表3.4、图3―7所示,所有受试者在急性大强度运动后机体氧自由基含量均16 实验结果有所增加。对照组由运动前的302.87-4-40.46(mg/dL)升高至395.87+39.04(mg/dL), 升高幅度非常大,差异非常显著(P<0.01)。实验组由运动前的235.00-x28.19(mffdL) 升高至292.37+33.54(mg/dL),也有明显升高,差异显著(P<O.05)。此外,运动后对照组与实验组氧自由基含量分别为:395.87+39.04(mg/dL)和292.37+33.54(m鲋L),实验组平均值明显低于对照组,差异非常显著(P<O.01)。表3-4无氧运动对机体氧自由基代谢的影响(注:t表示与对照组比较p<O.05,tt表示与对照组比较p<O.OI;撑表示与运动前比较p<O.05,槲表示与运动前 比较p<O.Ol。)O O 0 0 O 0 O匾萄司l!堡垫亘l对照组 实验组含量^单位:_1 碥/dL)∞%∞巧加L三加0 OO图3.7无氧运动对机体氧自由基代谢的影响3.2.2无氧运动前后机体抗氧化指标值的变化 如表3.5、图3.8所示,所有受试者在运动后机体的抗氧化指标值均有所降低。 对照组由运动前的1.14+0.09(mg/dL)下降到0.80-xO.09(mg/dL),降低幅度非常 大,差异非常显著(P<O.01)。实验组由运动前的1.47士0.08(mg/dL)下降到1.29+0.10 (mg/dL),差异非常显著(P<0.01)。此外,运动后对照组与实验组抗氧化指标值分别为:0.80a:O.09(mg/dL)和1.29-a:0.10(mg/dL),实验组平均值明显高于对照组,17 原花青素及运动对人体血液代谢指标影响的研究差异非常显著(P<O.01)。表3-5无氧运动对机体抗氧化指标值的影响(flZ:}表示与对照组比较p<0.05,?t表示与对照组比较p<0.01;撑表示与运动前比较p<0.05,擀表示与运动前比较p<0.01。)含1? 量1.^1.堕哩o.莹0.匾萄同j!鋈垫亘I对照组 实验组娶0.o0.图3.8无氧运动对机体抗氧化指标值的影响3.2.3无氧运动前后机体含1H类代谢物含量的变化 如图3-9的得分图所示,对照组在运动前后两组样本分布区域明显不同,结合其载荷图可见对照组在运动前后机体含1H类代谢物含量有差异。由图3.11、3.12 可见,柠檬酸、LDL较运动前发生了下降趋势,其中,柠檬酸下降幅度较大,差异 非常显著(P<0.01)(表3.6)。而乳酸较运动前有明显升高,上升幅度较大,具有非常显著性差异(P<O.01)(表3.6)。 如图3.10的得分图所示,实验组在运动前后两组样本的分布区域也明显不同,结合其载荷图可见实验组在运动前后机体含1H类代谢物含量发生了变化。由图 3.13、图3.14可见,其中柠檬酸、LDL较运动前发生了下降趋势,柠檬酸下降幅度 很大,差异非常显著(P<O.01) (表3.6)。而乳酸较运动前有明显的升高,上升 实验结果幅度也很大,差异非常显著(P<O.01)(表3.6)。此外,实验组在运动后与对照组相比,柠檬酸显著高于对照组(P<0.05);乳酸与LDL显著低于对照组(P<0.05) (表3-6)____――●――――――――_r1__―――r――1―――r05}//7z//一―广―~-b.9 备c一9 ●c一1 ●b.-100.4■皿醢槽■b-{4葡05~――――…――r1缸.10■c-16 Ik.14fO 0rt■*12-0.5t7\ \\ \j州~j一一一1 o.0 2-▲64。1 o_o8?06_o●一82?0.0副惦C#+'r.知1越南1f'韬?0.4-0 3?0

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