肌肉组织的rns18s28s 18s 5s三条带清晰比其他两条亮(28s第二亮,5s最暗)是什么问题呢???

请问,有两个问题,如第一个图是提取RNA,28s和18s之间有多条带,第二个是用2XTaq Green Mix检验的结果_百度知道
请问,有两个问题,如第一个图是提取RNA,28s和18s之间有多条带,第二个是用2XTaq Green Mix检验的结果
条带有向下拖尾,为什么会这样,这两者的结果有什么联系吗
中间多的条带应该是降解带,也就是说你提的RNA降解了。RNA的质量不高首先,再做PCR就不太能说明问题了。而且不知道你第二个图的目的是什么,你的提取RNA的效果不太好,28s的亮度应该是18s的2倍
第二个图为反转录成cDNA后用Taq Green Mix 检验的图片,为什么会有向下的拖尾
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PCR如果发现没扩出目的大小片段RNA降解,用一下北京华越洋的外源RNA酶清除剂,考虑引物和CDNA是否有问题。建议RNA跑出来OD值,电泳图检测都没问题了,在考虑后续实验,就可以解决
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总RNA电泳18s比28s亮很多是什么原因
我有更好的答案
rRNAs是细胞中含量最多的一类RNA,且分子量比较大,代谢都不活跃,种类仅有几种,原核生物中主要有5SrRNAs、16SrRNAs和23SrRNAs三种,真核生物中主要有5SrRNAs、5.8SrRNAs、18SrRNAs和28SrRNAs四种。我觉得应该18S有才对
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&&E. coli total RNA 提取,5s 底部条带特别亮,28s和18s较弱,这是什么原因
E. coli total RNA 提取,5s 底部条带特别亮,28s和18s较弱,这是什么原因
这是用 Trizol 法提取的E. coli&&total RNA,异丙醇沉淀 -20℃ 2h。
底部5s 条带特别亮,28和18s 条带清晰,不像降解。不知道什么原因,各位有谁遇到过这个问题吗?这是什么原因导致的?
E. coli 是K12 MG1655菌种,没有任何突变或转质粒处理。
如果是23s 和 16s 降解,它们的条带没有拖尾,这又是咋一回事?
可能并不是出现在你的提取过程中的降解,而是你用的材料本身已经不新鲜了导致的23和16微弱的条带,
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trizol法提取组织的RNA,只出现了一条条带,且确定不是5S,有可能是18A或28S吗?
一条条带?加点DNase 消化下 看看还有吗 呵呵
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【求助】提的总RNA,OD值正常,但跑电泳却发现5S条带特别亮
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这个帖子发布于8年零20天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
我刚开始接触分子实验,老板要我连一个原位杂交用的探针载体,要我先从脑组织中提总RNA,然后做反转录,克隆出来目的片段。我提了一次测得浓度和OD值都挺正常的,但一跑胶发现5S的条带特别亮,而28S,18S的条带却很弱,是降解了吗?但我在-80°C存放一天后再测OD,也基本没什么变化。260/280 2.029 260/230 2.027浓度为2.377μg/μl我用的是普通的凝胶电泳,我们实验室其他也是用的普通的凝胶跑得,条带就挺正常的。请大家给个意见,谢谢!
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麻烦各位高手给点指导意见,感激不尽
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普通凝胶电泳发生降解很正常。不过你放-80度一天再测发现OD不变不说明问题,RNA酶还没强大到-80度在24小时就给你消化多少RNA.胆子大的话,把你的样品放37度1个小时再测OD玩玩,不变的话说明没事。有事的话,嘿嘿。重新抽吧
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OD值跟降解几乎是两个概念。即使降解,也是有吸收峰的。OD值只反应污染、盐离子,或简单的说代表RNA的纯度,电泳则相反,只检测降解情况,不管纯度。另外,跟楼上的什么放-80度,或放37度几小时再测浓度也毫无意义。降解发生在你提RNA之前或者提RNA的时候,提好了,只要你溶解的水是RNase free的,一般就没什么关系。至于降解,对什么而言了,对一些要求高点的,那建议重提,对一些普通的RT,则没什么关系,你可以直接go ahead
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