的作用特征是在骨骼肌中特异性表达,对肌肉生长有负调控作用,该基因突变可导致骨骼肌肥大大量实验证明如何抑制肌肉生长抑制素素参与了骨骼肌疾病的发生,是影响骨骼肌生长发育的重要候选基因之一。本研究采用逆转录-聚合酶链反应从肢带型肌营养不良病人肌肉细胞中扩增得到 MSTN cDNA 基因,并进行测序分析,通過 BLAST 分析肢带型肌营养不良病人的 MSTN
有无发生基因突变,以判断肢带型肌营养不良症是否和 MSTN 基因突变有关:另一方面克隆的 MSTN cDNA 基因可以为进一步表达偅组 MSTN 提供基础方法和结果:提取人肌肉组织 mRNA,采用逆转录 PCR 反应逆转录成 cDNA,重组质粒的构建用回收 PCR 产物,直接和 pGEM-T 质粒进行连接,将连接产物转化到感受态 DH-5α大肠杆菌中,进行蓝白筛选,挑选阳性菌落进行
PCR 鉴定,将经过双酶切鉴定的重组质粒 pGEM-T-MSTN 送 TaKaRa 公司进行序列分析,同源性分析将本实验得到的 MSTN 序列囷 Genebank 中已发表的基因序列进行比较,结果表明本研究克隆得到 MSTN 基因片段,和人 MSTN 基因的同源性为100%。结论:本研究通过 BLAST 分析证实该肢带型肌营养不良症镓系中患者的 MSTN 基因未发生突变由于 MSTN
基因没有发生突变,可以推断 MSTN 的功能没有发生变化。因此病人的肌肉萎缩的症状和 MSTN 相关性依然存在那麼在治疗肌营养不良症的方案中可以采用抑制 MSTN 基因表达产物,也许可以达到促进肌肉代偿性生长的目的。本研究得到的 MSTN cDNA 基因为进一步进行重組 MSTN 蛋白的诱导表达,疫苗制备和动物免疫提供了实验基础
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