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乙酰胆碱酯酶的测定方法--求解详细的
最近想做虫子体内一线胆碱酯酶的活性测定,查阅了很多文献,但还是不知道怎么下手,各文献中的缓冲液不一样,反应体积不一,最郁闷的是测定的时候用的波长也不一样,有用405 ,410,412nm的,越看越糊涂了,有没有高手指点迷津??
?谢谢了!!!!!
买个试剂盒就行了,如果没有特殊要求的话 何必那么麻烦 你参考一下和你最相近的虫子的AChE 测定方法 对啊,找个相近的试试看嘛 Ellman法的要求是在412nm,这可以通过分光光度计(光栅型)的进行测定。但是你如果要用酶标仪的话,它是滤光片型的。只有410nm的,所以只有选择这个nm处。关于缓冲液一般用PBS缓冲液。反应体系你就要根据文献自己摸索了。。。建立自己的方法,并对建立的方法进行线性分析,确保方法的正确。。 这个不是很熟,学习中。
5楼的讲得有道理。
印象中乙酰胆碱酯酶测定一般用比色法,但测定波长与显色剂有关,可能还与缓冲液有关,所以你要自己摸索,建立自己的分析方法。Good luck. 我用的是Tris缓冲液,pH 8.0,用酶标仪405nm处测定。根据实验室情况,选择合适的方法。 25 μL的ATCI
125 μL的DTNB
50 μL的缓冲液B
25 μL 的样品溶液
最后是25 μL 的0.226 U/mL的AChE
96孔板最后加样总体积250 μL . : Originally posted by laiyin_111 at
25 μL的ATCI
125 μL的DTNB
50 μL的缓冲液B
25 μL 的样品溶液
最后是25 μL 的0.226 U/mL的AChE
96孔板最后加样总体积250 μL . 请教一下,我做的乙酰胆碱酯酶抑制剂活性这个试验的时候,加的量和你说的是一样的,但是我加的顺序不一样。我先加50缓冲液,再加样品,再加酶。4摄氏度反应20分钟,然后再加ATCI和显色剂,37摄氏度反应20分钟,最后测吸光度值。这样做这个试验对吗?但是我计算的抑制率结果都是负数,这个样品肯定是有抑制的啊。我的阳性药结果较好。请问我做的这个试验有什么问题,请给点意见吧~ : Originally posted by tzatmgz at
请教一下,我做的乙酰胆碱酯酶抑制剂活性这个试验的时候,加的量和你说的是一样的,但是我加的顺序不一样。我先加50缓冲液,再加样品,再加酶。4摄氏度反应20分钟,然后再加ATCI和显色剂,37摄氏度反应20分钟,最后 ... Rhee, I.K.; Meent, M.V.D.; Ingkaninan, K.; Verpoorte, R. Screening for acetylcholinesterase inhibitors from Amaryllidaceae using silica gel thin-layer chromatography in combination with bioactivity staining . J. Chromatogr. A., , 217–223.
这篇文献建议精读。
我不知道你的抑制率计算公式是什么,使结果会出现负值。一般来说,酶活力测定是通过动力学方法。最近几年来,好多文献作者为图省事,直接以吸光度比较来计算抑制率,我认为欠妥。好好参阅这篇文献,其他我就不多说了。 : Originally posted by laiyin_111 at
我用的是Tris缓冲液,pH 8.0,用酶标仪405nm处测定。根据实验室情况,选择合适的方法。 文献用tris缓冲液,自己做的时候可以改为磷酸缓冲液吗,会不会有影响,谢谢! : Originally posted by laiyin_111 at
25 μL的ATCI
125 μL的DTNB
50 μL的缓冲液B
25 μL 的样品溶液
最后是25 μL 的0.226 U/mL的AChE
96孔板最后加样总体积250 μL . 25 μL的ATCI
125 μL的DTNB
50 μL的缓冲液B
25 μL 的样品溶液
这些有浓度吗,样品要用什么溶解比较好呢?谢谢 早些时间才测过,买个试剂盒就有全套流程,只要你实验室有仪器就行 : Originally posted by laiyin_111 at
25 μL的ATCI
125 μL的DTNB
50 μL的缓冲液B
25 μL 的样品溶液
最后是25 μL 的0.226 U/mL的AChE
96孔板最后加样总体积250 μL . laiyin&&又看见你的帖子了,加上我QQ吧:cry::arm:什么是3C解决方案?谁能细致的讲一下
什么是3C解决方案?谁能细致的讲一下 5
比如 每行有每行的3C方案还是所有的行业都可以用3C解决方案
不区分大小写匿名
3C认证就是是中国强制性产品认证的简称。对强制性产品认证的法律依据、实施强制性产品认证的产品范围、强制性产品认证标志的使用、强制性产品认证的监督管理等作了统一的规定。主要是试图通过“统一目录,统一标准、技术法规、合格评定程序,统一认证标志,统一收费标准”等一揽子解决方案,彻底解决长期以来我国产品认证制度中出现的政出多门、重复评审、重复收费以及认证行为与执法行为不分的问题,并建立与国际规则相一致的技术法规、标准和合格评定程序,可促进贸易便利化和自由化。
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新淫求解!想细致的了解一下风云的剧情!
我以前只看过风云的电视剧,到吧里一看,原来还有这么多人物,招式也是一个比一个炫酷!但是,我究竟是看好还是看漫画号?到底哪个才是原著啊???漫画差别大吗???谁写的?漫画我只知道是姓马的大师画的,上次看新闻说他今年要完结风云,我才猛然想起还有这么经典的漫画!如上,跪求指教一二!
这是改了性别之后第n个...
第一部经典,第二部升华,第三部扯淡。
自己从头到尾认真看一遍,比谁解说都强,实在不清楚的就看精品区也不迟,那么急做什么
这么迟才看漫画啊?当年我看完风云电视剧后再去看漫画,感觉漫画可比电视剧好多了·····电视剧的第一部角色还是选得不错的·····
漫画才是真风云。第一部情节曲折,引人入胜,画风多样,细节刻画用心,但有时有小幼稚的图片。第二部世界体系更宏大,武术层次和各种天赋符文更华丽,但都画成大长脸,女性很丑。第三部心理刻画很出色,色彩鲜艳,造型多变,但情节无限扯淡,时常出现走形。但还是推荐你看看漫画。
没记错的话,小说也是马荣成主编的吧!---  ╭══╮ ┌═════┐ ╭╯让路║═║水军专用车║ └══⊙═⊙═~----╰⊙═⊙╯   ╭══╮ ┌═════┐ ╭╯让路║═║挽尊专用车║ └══⊙═⊙═~----╰⊙═⊙╯ 专业挽尊三十年,挽过的楼主尸体可绕地球十圈,品质有保障。
漫画看第一和第二部就足够了,第三部千万别看。
问@圣辰2047
要不是第一和第二部的经典。。。第三部有谁看...........
该说的上面的前辈们都说过了楼主你好,我是新人圣辰,刚刚进贴吧,希望您以后能多多关照哈~最近贴吧有一群针对我的势力,拼命打压我这样的新人,让我不敢大声发言,所以来楼主这里透口气儿~谢谢以后要一起进步哟
第一部必看,第二部看看也不错,第三部别看为妙
我是直接看的第三部
我最喜欢第二部和三部开篇和十魔篇
内&&容:使用签名档&&
保存至快速回贴电击JJ有什么好坏之处求解!_百度知道
电击JJ有什么好坏之处求解!
用打火机里的电打火的电电击JJ的gt感觉很刺激,但不知道有什么好坏之处?求解细致回答!
提问者采纳
没什么坏处,不过好像有点SM。还是不要太频烦了,你多大个人啊,现在就这样刺激的话以后保不准会有什么问题呢。
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其他3条回答
jj会坏的!不能生育!想爽的话去搞基啊!
当心以后报废。
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