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nginx/1.4.1DAL-1基因的蛋白表达及其点突变（1810C&T/575Cys&Tyr）与非小细胞肺癌转移的关系--《广州医学院》2010年硕士论文
DAL-1基因的蛋白表达及其点突变（1810C&T/575Cys&Tyr）与非小细胞肺癌转移的关系
【摘要】：研究背景与目的
肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,其中80%～85%为非小细胞肺癌(None Small Cell Lung Caneer,NSCLC)。侵袭和转移是导致NSCLC治疗失败及绝大多数患者死亡的主要原因,因而寻找肺癌侵袭和转移相关基因及其分子指标成为当前迫切需要解决的问题。
DAL-1(Differentially expressed in adenocarcinoma of the lung)是4.1家族成员之一,在NSCLC、乳腺癌和脑膜瘤中表达下调或缺失[1-4]。转染DAL-1至NSCLC和乳腺癌细胞株中使其重新表达,可抑制这些细胞增殖[1,5],表明DAL-1是一种肿瘤抑制基因。
免疫细胞化学方法显示DAL-1蛋白定位于细胞膜的胞质侧,主要集中在细胞间的连接处,呈“honeycomb”状分布[1]。Charboneau AL等[6]研究发现DAL-1表达可以增强乳腺癌细胞之间的连接。我们前期体外实验发现,沉默DAL-1蛋白表达可使NSCLC细胞侵袭和迁移能力增强[7]。由此推测,该基因表达缺失可能削弱细胞间的连接和黏附从而导致肿瘤细胞易于发生脱落和转移。本次实验我们拟通过对人肺癌组织中DAL-1蛋白表达进行检测,并与临床病理因素进行对比分析,进一步验证DAL-1表达与NSCLC转移的关系。
基因失活的机制包括基因缺失、突变等遗传学机制及DNA甲基化、染色质构象变化等表观遗传学机制。我们前期研究发现,DAL-1基因启动子甲基化是导致NSCLC细胞系和细胞株中DAL-1表达缺失的主要原因;但在部分DAL-1表达缺失的肿瘤细胞中,DAL-1基因启动子并没有出现甲基化[7],因此推测可能存在其他导致DAL-1表达缺失的原因。点突变是基因表达缺失的常见原因之一,目前研究认为DAL-1存在多个点突变位点,包括:1810 CT/575CysTyr,2166 CT/704ThrThr,2146 GT/716 AlaSer,2166 CT/722ThrThr等,其中1810 CT/575CysTyr突变发生频率较高,且为错义突变[8-10]。因此本研究通过对人体组织DAL-1基因1810CT/575CysTyr点突变的检测,分析其与DAL-1蛋白表达的关系,进一步探讨DAL-1蛋白表达缺失的原因。
一、免疫组化方法检测石蜡包埋的NSCLC组织167例(其中149例备有配对癌旁组织)的DAL-1蛋白表达,分析其与NSCLC临床病理因素的关系。数据采用χ2检验进行统计学分析。
二、提取204例NSCLC患者配对组织标本(石蜡包埋NSCLC组织和同一患者正常淋巴结组织)及112例NSCLC患者新鲜血液标本(共316例)基因组DNA,PCR-RFLP方法检测DAL-1基因1810 CT基因型,分析1810 CT点突变与DAL-1蛋白表达及NSCLC转移的关系。数据采用χ2检验进行统计学分析。
一、167例NSCLC组织中,DAL-1蛋白阳性表达97例(58.1%),阴性70例(41.9%)。其中149例NSCLC配对标本中,癌旁组织DAL-1阳性表达135例(90.6%),阴性14例(9.4%);癌组织DAL-1阳性表达87例(58.4%),阴性62例(41.6%);NSCLC癌组织DAL-1阳性表达率显著低于癌旁组织(p0.05)。
二、167例NSCLC组织中,DAL-1蛋白表达阳性率在肿瘤最大直径≤3cm组(47/66)显著高于肿瘤最大直径3cm组(50/101()p0.01),未发生转移组(64/78)显著高于转移组(33/89()p0.000),Ⅰ期、Ⅱ期(67/91)显著高于Ⅲ期、Ⅳ期(30/76)(p0.000)。其中148例腺癌和鳞癌DAL-1蛋白表达阳性率高、中分化组(63/93)显著高于低分化组(27/55)(p0.005)。
三、316例NSCLC患者DAL-1 1810 CT基因型分布:野生型基因型TT293例(92.7%),突变型基因型23例,突变率为4.1%。其中CT20例(6.3%),CC3例(0.9%)。204例NSCLC患者正常淋巴结组织与其NSCLC组织配对资料共408个标本基因型检测结果表明:各例NSCLC肿瘤组织和相应正常淋巴结组织基因型完全一致。
四、167例NSCLC组织中,发生DAL-1 1810 CT点突变者13例。13例发生点突变患者的癌组织中DAL-1蛋白阳性表达5例,阴性8例;相应的癌旁组织DAL-1蛋白阳性表达7例,阴性5例,1例无配对癌旁组织。5例点突变患者癌组织DAL-1蛋白虽阳性表达,但均发生转移。提示DAL-1 1810 CT点突变可能削弱DAL-1对肿瘤转移的抑制作用。
五、在316例标本中,突变的23例中17例发生转移,6例未发生转移;在293例野生型的标本中,149例发生转移,144例未发生转移,NSCLC转移在DAL-1突变型与野生型组间差异有统计学意义(p0.025)。提示DAL-1 1810 CT点突变可能导致NSCLC更容易发生转移。
六、分析经免疫组化方法检测蛋白表达的167例NSCLC组织DAL-1 1810 CT点突变与肿瘤临床病理因素关系发现,DAL-1 1810 CT点突变基因型分布频率在肿瘤最大直径≤3cm组(6/66)与肿瘤最大直径3cm组(7/101),Ⅰ期、Ⅱ期组(8/91)与Ⅲ期、Ⅳ期组(5/76),组间无显著性差异(P0.05)。DAL-1 1810 CT点突变基因型分布频率在转移组(11/89)与无转移组(2/78)间有显著性差异(P0.025)
一、人NSCLC肿瘤组织存在DAL-1蛋白表达降低、缺失现象。
二、NSCLC转移组的DAL-1蛋白表达阳性率显著低于未转移组,提示DAL-1蛋白表达降低、缺失可能与NSCLC转移有关。
三、人NSCLC组织中DAL-1 1810 CT突变率为4.1%。DAL-1 1810 CT点突变不是导致DAL-1蛋白表达降低、缺失的主要原因。DAL-1 1810 CT点突变可能与NSCLC转移有关,尚需用基因定点突变技术进一步证实。
【关键词】：
【学位授予单位】：广州医学院【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2010【分类号】：R734.2【目录】：
主要英文缩略语3-4中文摘要4-7英文摘要7-11前言11-15第一部分 DAL-1 基因蛋白表达的检测15-19 一、材料15-16 二、方法16-17 三、结果17-19第二部分 DAL-1 基因点突变（1810 C>T/575CYS>TYR）的检测19-29 一、材料19-20 二、方法20-23 三、结果23-29讨论29-34结论34-35参考文献35-38附图38-40综述40-47 参考文献44-47致谢47-48
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京公网安备74号化疗时肠外氨基酸营养支持治疗对老年非小细胞肺癌患者生活质量影响的临床研究--《安徽医科大学》2008年硕士论文
化疗时肠外氨基酸营养支持治疗对老年非小细胞肺癌患者生活质量影响的临床研究
【摘要】：
目的通过给予老年非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者在化疗期间应用9-复合氨基酸(9-aminofusin,9-AF)肠外营养支持治疗,进行前瞻性临床试验研究,探讨肠外氨基酸营养支持对老年NSCLC患者化疗前后生活质量(quality of life,QOL)的影响,评价患者化疗前后机体营养状态的变化,为临床上给与老年NSCLC患者合理应用肠外营养支持(Parenteral nutrition,PN)治疗提供理论依据。
方法选择经病理确诊的78例老年NSCLC患者,随机分为试验组(A组)和对照组(B组),两组均两组均应用统一的NP(长春瑞滨+顺铂)化疗方案。A组(40例)除给予常规化疗外,另给予9-AF肠外营养支持治疗,500ml/d,d1-d8;B组(38例)单纯常规化疗,连续应用三个周期。分别在每一周期化疗前三天和第三周期化疗后20天采用欧洲癌症研究与治疗组织(European organization for research and treatment of cancer,EORTC)生活质量核心问卷(QLQ-C30)量表和肺癌特异性模块QLQ-LC13量表调查随访患者化疗前后的QOL状态;测量患者体质比(BMI)、血清白蛋白(ALB)、血清前白蛋白(PAB)、血转铁蛋白(TRF)、淋巴细胞计数(LC),评价患者化疗前后营养状态。
结果①QLQ-C30量表指标分析显示,躯体功能在两组化疗后均较化疗前改善(P0.05),化疗前后得分分别为A组65.65±14.34和89.36±7.24,B组68.24±11.53和80.54±10.66,但A组较B组改善更明显(P0.05);情绪功能和社会功能在A组化疗后较化疗前明显改善(P0.05),在B组无变化,情绪功能A组化疗前后得分分别为61.52±9.67和88.43±15.26,B组分别为65.41±11.38和70.16±10.24,社会功能A组化疗前后得分分别为66.21±7.24和86.51±14.37,B组分别为69.14±9.83和77.16±11.62,化疗后A、B两组情绪功能和社会功能差异显著(P0.05);角色功能在两组化疗后较化疗前均降低(P0.05),但化疗后两组比较无差异;认知功能在两组化疗前后均无变化。化疗后两组患者总体健康指标均较化疗前升高(P0.05),经济困难均加重(P0.05),但化疗后两组之间比较无差异。对各单项指标进行分析显示,失眠、疲倦症状在A组化疗后较前严重,但无统计学意义,而在B组化疗后较化疗前呈加重表现(P0.05),食欲下降症状在A、B两组化疗后均较前加重,但A组化疗后食欲下降较B组减轻,A、B两组失眠、疲倦、食欲下降指标化疗后差异有统计学意义(P0.05);疼痛、呼吸困难症状在A、B两组化疗后均较前减轻,但两组化疗后无差异;恶心呕吐、便秘、腹泻症状在A、B两组化疗后均较前加重,但两组化疗后比较无差异;一些患者出现口舌疼痛、手足刺痛、脱发等化疗副作用,但A组与B组比出现口舌疼痛症状的患者较少(P0.05),分别占8.3%和18.4%。A组较B组总体QOL提高。②老年NSCLC患者治疗前普遍存在营养不良现象,化疗后更明显,A、B两组化疗后BMI分别为17.8±2.56 kg/m2和15.1±2.31 kg/m2,化疗后两组患者体质比(BMI)均有不同程度的减小,A组与化疗前相比无差异,而B组较化疗前严重,两组化疗后差异有统计学意义(P0.05);化疗前患者血清白蛋白、血前白蛋白、血转铁蛋白、淋巴细胞计数处于正常低值或者低于正常,分别为A组39.55±3.94g/L、181±12.56mg/L、246±23.71mg/dl和0.8±0.07×10~9,B组39.48±3.75g/L、183±15.53mg/L、242±21.33mg/dl和0.91±0.12×109,化疗后较前均不同程度的降低,化疗后两组比较显示A组血清白蛋白和前白蛋白比B组值高,分别为A组31.83±3.95g/L和170±9.78mg/L,B组26.64±3.22 g/L和149±10.56mg/L ,两组化疗后差异有统计学意义(P0.05),而血转铁蛋白、淋巴细胞计数无差别。
结论①长春瑞滨联合顺铂化疗方案对老年NSCLC患者的QOL有较大影响,化疗时给予肠外氨基酸营养支持治疗能明显提高老年NSCLC患者的躯体功能、情绪功能、社会功能、缓解失眠、食欲下降和疲倦症状,改善患者化疗期间的QOL,提高化疗收益。②老年NSCLC患者普遍存在营养不良现象,化疗后进一步加重,给予肠外氨基酸营养支持治疗可以减轻患者营养不良的程度,维持体质比在化疗前水平。③老年NSCLC患者体内蛋白质合成降低,化疗前患者血清白蛋白、血前白蛋白、血转铁蛋白、淋巴细胞计数处于正常低值或者低于正常,化疗后均低于正常,给予患者肠外氨基酸营养支持治疗可减轻上述指标的降低程度。
【关键词】：
【学位授予单位】：安徽医科大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2008【分类号】：R734.2【目录】：
1. 英文缩略词表5-7
2. 中文摘要7-10
3. 英文摘要10-14
4. 正文14-56
1）前言14-17
2）材料与方法17-20
3）结果20-44
4）讨论44-51
6）参考文献51-56
5. 附表56-60
6. 附录60-62
7. 致谢62-63
8. 综述及参考文献63-69
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京公网安备74号中国小细胞肺癌RET基因突变的研究--《第13届全国肺癌学术大会论文汇编》2013年
中国小细胞肺癌RET基因突变的研究
【摘要】：正目的:小细胞肺癌具有典型的神经内分泌表型,多种神经内分泌相关的生物分子参与小细胞肺癌的疾病发生和进展,因此成为小细胞肺癌治疗中潜在的靶点。同时,这些生物分子也有可能成为小细胞肺癌临床治疗中的疗效预测因子和生存预后因子。RET基因参与多种神经内分泌肿瘤的发病,例如RET基因突变是2型多发性内分泌腺瘤的重要致病原因,以RET为靶点的靶向药物开发也在小细胞肺癌中进行。为了评估RET基因突变在小细胞肺癌中的临床应用价值,我们检测了在吉林省肿瘤医院诊治的小细胞肺癌患者RET基因的突变情况。方法提取肿瘤组织基因组DNA,采用PCR扩增和直接测序法,检测常见的RET基因外显子10
【作者单位】：
【分类号】：R734.2【正文快照】：
目的:小细胞肺癌具有典型的神经内分泌表型，多种神经内分泌相关的生物分子参与小细胞肺癌的疾病发生和进展，因此成为小细胞肺癌治疗中潜在的靶点。同时，这些生物分子也有可能成为小细胞肺癌临床治疗中的疗效预测因子和生存预后因子。RET基因参与多种神经内分泌肿瘤的发病
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