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淘豆网网友近日为您收集整理了关于银杏叶提取物对酒精所致大鼠肌肉氧化损伤保护作用的初步和研究的文档，希望对您的工作和学习有所帮助。以下是文档介绍：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名: 童查:叠签字日期:啤年三月上日学位论文版权使用授权书本学位论文作者及指导教师完全了解大连医科大学有关保留、使用学位论文的规定,同意大连医科大学保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。论文作者签名:指导教师签名:签字日期:咝年』月4-曰银杏叶提取物对酒精所致大鼠肌肉氧化损伤保护作用的初步研究硕士研究生:指导教师:指导小组:专业名称:于志扬王剑锋教授张利教授神经病学摘要慢性酒精中毒性肌病(Chronic alcoholic myopathy,CAM)在西方国家是最常见的肌病之一,国外有资料显示大约30%~60%的长期饮酒者患有此病,在临床发病率较高。近年来,国内酒精中毒患者有增多趋势,但对酒精中毒性肌病仅有少数临床报道,对此病发病机制及预防方面的研究基本是空白。慢性酒精中毒性肌病的发病机制是多因素的,但仅有部分得以阐明,研究表明氧化一抗氧化状态的失衡影响了酒精性中毒性肌病的发生和发展。氧化应激与多种肌病的病理过程有着密切关系,酒精代谢过程中的自由基和脂质过氧化学说已得到多数学者的认可,酒精能够使骨骼肌氧化应激增强,氧化应激可诱导肌萎缩的发生。与遗传性肌病相比,酒精性肌病是唯一可治疗干预的肌病。银杏叶标准提取物是从银杏叶中提取的混合物(6%萜内酯、24%黄***苷),研究表明其具有抗氧化作用。目前国内外用银杏叶提取物(EGB)作为清除自由基和抗脂质过氧化的药物来治疗心脑血管疾病等方面的报道很多,而在慢性酒精中毒性肌病中尚未见报道,因此,在CAM患者日益增加的今天,对于该病发病机制及预防用药的研究具有重要的社会意义。目的:本实验拟在建立大鼠慢性酒精中毒性肌病模型的基础上,同时采用EGB预防给药,观察大鼠骨骼肌组织氧化一抗氧化指标的变化以及肌肉组织病理学的改变,探讨EGB的预防保护作用及其可能的作用机制。方法:(1)雄性SD大鼠56%酒精灌胃前,EGB采用分组(低剂量组481xg/g bw和高剂量组96I.tg/g bw)预防性给药的方法,两组均喂饲改良的全营养高脂饲料。(2)于12周后,取模型组后肢肌肉,在分离出比目鱼肌、跖肌后,分别制备成冰冻切片,经组织化学染色确认成模后将各组各类肌肉均分别地制各成冰冻切片和肌组织匀浆,采用分光光度计法检测抗氧化指标…超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH—Px)和丙二醛(Maleicdialdehyde,MDA)活性的变化。结果:(1)生化指标检测结果:以II型肌纤维为主的肌肉(跖肌)中,除了低剂量EGB对GSH—Px没有影响外,EGB干预组SOD、GSH—Px、MDA值要优于模型组(P&0.05),而以I型肌纤维为主的肌肉(比目鱼肌)中,除EGB干预组MDA值较模型组有显著降低外,SOD、GSH—Px活力各组均无显著性差异(P&0.05)。(2)肌肉形态学观察显示酒精染毒大鼠骨骼肌纤维出现了肌纤维变性、坏死,肌纤维萎缩呈角形、条形或不规则形改变,肌间结缔组织增生等病理改变。而与模型组相比,EGB明显改善大鼠肌肉病变程度。结论:1.长期摄入酒精能诱发大鼠骨骼肌的氧化应激反应,导致氧化抗氧化失衡。2.EGB可作为一种预防性的抗氧化剂,通过增加抗氧化物质活性,抑制脂质过氧化反应起到减轻酒精所致肌肉氧化损伤的作用。关键词:慢性酒精中毒性肌病 EGB抗氧化Protective effects of extractetha01.induced oxidativeof ginkgo biloba againstinjury in rat musclesPostgraduate:Yu Zhi YangSupervisor:Professor Wang Jian FengVice Supervisor:Professor Zhang LiMaj or:NeurologyAbstractChronic alcoholic myopathy(CAM)is one of the most frequent causesof acquired skeletal myopathy in developed countries,which affects up30%-60%of all alcohol misusers.Amount of alcohol poisoning patients inour country is ing more and more in recent years.However,there ismerely a few clinical reports about CAM in our country,and with respect tothe research of the CAM pathogenesis and prophylaxis,it’S still vacantessentially.The underlying mechanisms responsible for CAM arc multiplefactors,and only part of which is elucidated,studies have found that theimbalance of oxidation and anti.oxidation system affects the genesis anddevelopment of CAM.Oxidative stress is closely correlated withpathological proceeding in some myopathies.Theories of free radicals andlipid peroxidation during the metabolism of ethanol have been admitted byresearchers.Increased oxidative stress can be induced by alcohol,which cancause atrophy of skeletal pare with the ic myopathy,CAM is the only treatable muscle disease.EGb is a standardized extract ofGinkgo biloba leaves containing 24%flavone glycosides(primarilyquercetin.kaempferl and 6%terpene lactones).EGB has antioxidantproperties EGB is mostly used to treat cardiac and cerebral vasculardiseases as a free·radical scavenger and anti lipid peroxidation presentlyin China and Western countries:However,the application of EGB on CAMhasn’t been reported domesticallY and abroadThus,with the increasing daily of the CAM patients,it has theimportant social significance to research the pathogenesis and treatment ofCAM deeply.1Objective:This study is designed to investigate whether EGB carlprotect againstthe oxidative injury in rat skeletal muscles of CAM and the possible mechanismresponsible for it through obersavation of the chmlge of oxidatant—antioxidantstatus and pathologic changes。Methods:(1)The rats were pretreated with EGB(48,9699/g bw perday)before 56%ethanol gastric incubation and they are all feeding the sameimproved food with high fats and sufficient nutrients.(2)1 0 weeks later,take the muscle of posterior limb,after separating the soleus、plantaris,toprepare the frozen section and muscular tissue homogenate of the each kindof muscle respectively.After it is confirmed to form the myopathy model bythe histochemical stain,measure the activities of superoxide di smutase(SOD),glutathione peroxidase(GSH—Px)and the malondialdehyde(MDA)inthe muscle specimens every group respectively by Spectrophotometer.Results:(1)Spectrophotometer method show:EGB-treated groups showa increase in the level of SOD、GSH—Px(P&0.05)and a reduction in thelevel of pared with CAM model group(P&0.05)in the plantariswith major proportion of type II fibers.except for the low—dose EGB havingno effect on the level of GSH—Px(P&0.05).Except for MDA level inEGB—treated shows a pared with CAM model group(p&O.05),the rest all show no obvious difference in the soleus with major proportionof type I fibers.(2)The CAM rat shows typical pathological change in theskeletal muscle,such as myofibro sis、necro sis,the shape of the muscle fiberatrophy es triangle、strip or irregular,and the connective tissueamong the muscle tissue e hyperplasia,and SO on.EGB can attenuatethe degree of pathological change.Conclusions:(1)Alcohol can induce the oxidative stress reaction,which results in the OXidant.antioxidant status imbalance in the skeletalmuscle.(2)EGB possessed the protective effects from ethanol-inducedmuscle injury as a preventive antioxidant by improving antioxidant enzymeactivity,and inhibiting lipid peroxidation reaction.Key words:Chronic alcoholic myopathy extracts of Ginkgo biloba(EGB)antiOXidation4银杏叶提取物对酒精所致大鼠肌肉氧化损伤的保护作用的初步研究硕士研究生:指导教师:指导小组:专业名称:于志扬王剑锋教授张利教授神经病学刖嚣慢性酒精中毒性肌病是由于长期酗酒引起的一种肌肉病,约有30一60%的长期饮酒者患有不同程度的慢性酒精中毒性肌病,有资料显示它是西半球国家最常见的一种肌病【I】,其临床主要表现为肌无力、肌痛、肌萎缩和行走困难,严重影响患者的生活质量L2],CAM的特点是选择性侵犯II型肌纤维,而I型肌纤维相对不受累p J。国外对CAM的研究相对较为深入,然而,对其发病机制的相关研究也远远较酒精性肝病、酒精性心肌病少,酒精性肌病比酒精诱导的其它疾病如肝硬化、周围神经病、肠道疾病或是心肌病等更为常见一J,与遗传性肌病相比,酒精性肌病是可以治疗干预的肌病,然而国内目前对酒精中毒性肌病仅有少数临床报道,对此病发病机制的研究以及预防治疗的相关研究基本是空白。酒精中毒性肌病的发病机制有多方面的原因,仅有部分机理被阐明,目前认为乙醇及其代谢产物如乙醛、乙酸等都是肌肉***,其通过多途径、多环节造成肌细胞损害p“】。作为一种强烈的氧化应激原以及兼具亲水和亲脂性的高渗小分子,酒精在体内代谢过程中引起氧化一抗氧化的失衡,从而导致过度的自由基(ReaROS)的生成,且II型糖酵解、快收缩纤维集中的肌肉对此作用更为敏感弘J,Ferndmdez.Solb.【,1等在实验研究中发现CAM患者三角肌中的抗氧化物酶活性被干扰,同对照组相比,SOD有1 3%的升高,GSH—Px有16%的下降。Preedy&1等注意到该肌病主要累及II型肌纤维,酒精可增加胆固醇氢过氧化物和丙二醛蛋白加合物的浓度,活性氧簇(ROS)在酒精性肌病的病因学中起着至关重要的作用。银杏叶提取物(Ginkgo bilobaextract,EGB)是从银杏中提取的一种复杂的混合物,目前国际上标准银杏叶提取物中含有6%的萜类和24%的黄***醇,EGB通过其自身的还原能力或者通过对细胞内氧化还原状态的调节来发挥其抗氧化的生物作用p’…J,EGB在许多疾病的治疗上发挥着有益的效用,包括心脑血管疾病和神经变性疾病。然而目前为止,尚未有EGB对酒精所诱导的肌肉氧化损伤保护作用的相关研究。本实验旨在通过观察EGB干预用药对慢性酒精摄取大鼠骨骼肌中氧化和抗氧化系统的影响,初步探讨EGB预防用药的保护作用及其可能的作用机制,为探讨酒精所导致的骨骼肌损伤的发病机制和寻求有效的预防措施提供依据。材料与方法一、材料实验动物:健康、清洁级、雄性SD大鼠60只,1 60~200克,购于大连医科大学实验动物中心,自由食水,置于温度:20.25℃,湿度:50%.60%,12小时光照、12小时黑暗条件下,每笼5只饲养。二、试剂与主要仪器(一)试剂1.饲料:在标准全价饲料的配方基础上,每斤再加入鸡蛋一个,玉米油85mi,蒸熟后外加一定量鱼肝油、多维素,混合制成改良的全营养高脂饲料,每天现做。该饲料中蛋白:脂肪:碳水化合物(能量比)=1 8%:35%:11%,其余36%的总能量实验组由酒精给予,对照组由等体积的生理盐水,与国外Lieber--Decarli液体饲料中各成分能量比相同【l“。2.灌胃液:56。红星牌二锅头(北京酿酒总厂),用量(参照酒精性肝病模型的用量):开始49/kg/d,逐渐增至109/kg/d,维持此剂量,并辅以上述改良的全营养高脂饮食(高脂饮食可增加血中酒精浓度[1圳)。3.银杏叶标准化萃取物(EGb761):达纳康(法国博福一益普生制药工业公司,1片=40毫克纯萃取物4.10%水合***醛(黑龙江华润金玉实业有限公司)5.液氮(宜兴市化学试剂厂)6.1.5mmol/LTris—c1分离胶缓冲液(黑龙江华润金玉实业有限公司)7.苏木素染液(无锡医疗化学试剂厂)8.无水乙醇(黑龙江华润金玉实业有限公司)9.二甲苯液(黑龙江华润金玉实业有限公司)10.伊红染液(无锡医疗化学试剂厂)11.锇酸(宜兴市化学试剂厂)6 12.戊二醛(宜兴市化学试剂厂)13.醋酸双氧铀及柠檬酸铅(宜兴市化学试剂厂)14.环氧树脂(宜兴市化学试剂厂)15.SOD、GSH.Px、MDA测定试剂盒(南京建成生物技术有限公司)(二)主要实验仪器1.DSQ型大鼠灌胃器(淮北正华生物仪器设备仪器公司)2,可见光分光光度计(上海医疗器械七厂)3.试管(上海医疗器械七厂)4.TMP.1型电子天平(湖南仪器仪表总厂)5.恒温水浴箱(上海医疗器械七厂)6.匀浆器(湖北医用电子仪器厂)7.TGL.16C型台式离心机(上海安亭科学仪器厂)8.振荡器(湖北医用电子仪器厂)9. 微量加样器(上海医疗器械七厂)10.光学显微镜(日本Olympus Bx40型)11.冰冻切片机(德国leitz出品1516型)12.透射电镜(德国JEM一2000Ex型)三、实验方法(一)实验动物分组和慢性酒精中毒性肌病大鼠模型的建立Sprague—Dawley(SD)大鼠,经适应性喂养3天,将大鼠按体重随机编号分为4组,正常组(1 5只),模型组(1 5只),EGB低剂量干预组(1 5只),EGB高剂量干预组(15只),组问暴露无差异。在实验开始前称每只大鼠体重,前一个月每10天称重一次,以后每5天称重一次。每天清晨定时(9点)给大鼠用酒精灌胃,对照组给予含与酒精体积相等的体积生理盐水灌胃,银杏叶组在酒精灌胃前O.5h给药,同时各组均喂饲相同的全营养高脂饲料。试验过程中注意观察大鼠的鼻尖湿润度、粪便成形度、皮毛光滑度等健康状况,以及灌胃后酒醉程度。于第12周时取标本进行检测(二)形态学观察1.标本取材及制备(1)光镜标本迅速分离大鼠右后肢比目鱼肌和跖肌,修剪成长约5mm的小段后,用锡箔纸包裹,放入纱布袋内,迅速浸入液氮中速冻,然后取出部分跖肌分批制备成连续冰冻切片(61xm)用作观察肌纤维病理改变。将冰冻切片分别进行苏木精.伊红染色(HE)、四唑还原酶染色(NADH.TR)。、2)电镜标本1)取病变肌组织1mm3大小。2)将肌肉组织置于2.5%戊二醛中固定2小时,0.1mol的磷酸缓冲液洗3次,10分钟/Z欠。3)用锇酸固定2小时后,用0.1mol磷酸缓冲液洗3次,10分钟/ZR。4)系歹4梯度酒精脱水,环氧树脂置换,纯树脂渗透后,Epon812包埋聚合。5)用超薄切片机切片,片厚为69m。6)醋酸双氧铀,柠檬酸铅双重染色后,用透射电镜分别观察细胞内的主要的细胞器(如线粒体、内质网、细胞核等),摄片、成像。2.肌肉切片染色步骤1)将肌肉标本从液氮中取出,在冰冻切片机中将每个标本切5—6片,片厚61.tm,进行不同的组织化学染色。2)HE染色步骤:苏木素染色2.3分钟:流水冲洗2分钟:0 5%盐酸酒精10—1 5秒;热水冲洗:伊红染色2分钟;流水冲洗1分钟;过梯度酒精;二甲苯透明;中性树胶以盖片封片。3)NADH—TR染色步骤:O.05M Tris缓冲液30ml+NBT 30mg+NADH24mg混匀,放37℃恒温水箱孵育30分钟;蒸馏水冲洗3次:明胶以盖式拭只,(三)慢性酒精中毒性肌病的组织学诊断标准按MastagliaI&】等提出的慢性酒精中毒性肌病的组织学诊断标准:1.轻度肌病散在的肌细胞溶解。或者至少符合以下4条标准:(1)肌纤维萎缩。(2)炎性细胞浸润。(3)肌纤维再生现象。(4)肌纤维直径变异性增大。f5)核内移的肌纤维比例&10%。(6)&10%的肌纤维出现“虫噬”状改变。(7)&10%的肌纤维出现肌膜下异常物质沉积。(8)I型肌纤维占优势。f9)肌内膜下脂肪沉积。(10)肌纤维管状聚集。播放器加载中，请稍候...
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肌肉酸痛分为2种，一种是运动时或运动完即刻出现的肌肉酸痛，这是由于乳酸推积所致，因为这时乳酸含量达到高峰；另一种是运动第二天或第三天肌肉酸痛，这种酸痛大多因肌肉损伤所致；偶尔的肌肉纤维损伤导致的肌肉酸痛不足为奇，因为肌肉的生长的过程就是肌纤维的破坏到恢复的超量恢复过程，但长时间或剧烈的肌肉酸痛就是训练过度的体现，会对身体产生很大危害。
预防的肌肉酸痛的方法有：
1、做好健身前后的肌肉拉伸动作，以静态拉伸为主。
2、一定要循序渐进的原则，无论是负重还是训练强度，对于初练的人无负重健身尚且出现肌肉酸痛，何况是负重呢，无论你能举起多大的重量，都要从零强度慢慢加上去。
3、健身后补充蛋白质和碳水化合物进行肌肉的修复。
一旦在健身中出现肌肉拉...
以后别喝，会造成骨头坏死。
不用吃的！你应该对酒精有轻微的过敏！过两天就好了
嘌呤物过高
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女性喝葡萄酒竟有何好处
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　　葡萄酒是具又多类营养成分的高级饮料。以葡萄为原料的葡萄酒含有多种氨基酸、维生素、矿物质，这些都是人体必需补充的营养品，适度的饮用葡萄酒可以对人体的神经系统产生作用，提高肌肉的张度。
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