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麦冬多糖的结构分析及其体外抗氧化活性研究
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It is common in plants, plants and microorganisms. It is one of the essential materials to keep the life and its normal operation. People with advanced only the polysaccharide as a cellular structure composition and food origin, makes people of polysaccharide research far behind to nucleic acid and protein. Along with the protein and nucleic acid research deeply, polysaccharide intervention mechanism of tissue cell function description and polysaccharide special officinal value highlights the rich people's understanding of polysaccharide. Today, with polysaccharide structure, function and medicinal value is the focus of sugar engineering is thought to be following the protein engineering, genetic engineering, biochemistry and molecular biology category was originally a great scientific frontier, as if in the 20th century is protein and nucleic acid in the same period, the 21st century should be is a period of "sugar Life Sciences". Ophiopogon japonicus is a liliaceous plant dry root, an important production in Sichuan and Hubei Province, with the efficacy of YangYinShengJin, lungs and pure heart, for fever injury law, upset, thirst. Its important chemical composition is high flavonoids, saponins, volatile oil, the content of the organic elements, such as the inorganic elements and polysaccharide. Ophiopogon japonicus polysaccharide is one of an important active ingredients of Radix Ophiopogonis. With hypoglycemic, anti-aging, anti fatigue, help restraining tumor, anti radiation effect. In view of Ophiopogon japonicus polysaccharide has a variety of pharmacological action and psychological effect, caused the people's widespread concern, but today the nature of Ophiopogon japonicus polysaccharide structure research is rarely reported. The standstill in home and abroad and the research of basic research is the extraction of polysaccharides in Ophiopogon japonicus, respectively and purification, sulfated retouching, POJ, AP, AP A and AP 3, SS POJ and POJ eliminate the function of free radicals and preliminarily studied their chemical structures. Through the research above, in order for the comprehensive development of the application of Ophiopogon japonicus capital supply reference, efficacy of Ophiopogon japonicus product development supplies actual. The test results obtained the following: 1. Ophiopogon japonicus polysaccharide extraction: on the basis of the single experiment design 3 factors 3 levels orthogonal experiment, to get the hot water extraction of polysaccharides in Ophiopogon japonicus the best process parameters: extraction temperature of 80 DEG C, extraction time 2h, solid-liquid than 1: 10, under the premises of this process, Ophiopogon japonicus polysaccharide (POJ) extraction rate was 5. 62%, and the total sugar content of POJ was determined by phenol sulfuric acid method. Ophiopogon japonicus polysaccharide respectively and purification of: (1) quaternary ammonium salt precipitation method: POJ with 30g / kg of hexadecyl trimethyl ammonium bromide (CTAB) precipitation of Ophiopogon japonicus polysaccharide subgroups divided into ap - 1. The supernatant after the disposal of CTAB with 10g / kg H3BO3 and obtain Ophiopogon japonicus polysaccharide subgroups divided into AP 2 mol / L sodium the remaining supernatant, after the disposal of acetic acid, ethanol precipitation and then obtained Ophiopogon japonicus polysaccharide subgroups divided into AP 3. (2) DEAE 52 cellulose ion exchange column chromatography was applied to the classification of POJ. DEAE a 52 cellulose column with distilled water wash off the water washing grade POJ a 1. POJ 1 was purified by SephadexG 200 gel column chromatography. UV spectra and SephadexG 200 gel column chromatography for determining the homogeneous polysaccharide fractions. 2 of Ophiopogon japonicus polysaccharide sulfate reaction: chlorosulfonic acid pyridine method from Ophiopogon japonicus polysaccharide sulfate (POJ SS). For light yellow, with better water solubility, the 400nm, 268nm and 264nm have received a peak at 200 ~ 286nm, and the content of sulfate was 20. 24%, instead of 2. 89, infrared: 1257cm 1 in the spectrum of a O (a SO3 a) the characteristics of the receiver. . Ophiopogon japonicus polysaccharide preliminary structural analysis of research: Sephadex g 200 gel column chromatography measured AP, AP A and AP 2 3, POJ 1, POJ a SS and POJ SJ molecular weight separation 1184Dal. AP 1, AP 2, AP 3, POJ 1, POJ, SS,, POJ and SJ, 2M,,, and the composition of the polysaccharide. The results note that AP 1 is composed of mannose, glucose, Arabia sugar and fructose. AP 2, AP 3, POJ 1 and POJ 1 SJ are composed of glucose, mannose and fructose. SS POJ is composed of mannose, glucose and Arabia sugar. UV spectral scanning in 260nm, receiving peak at 280nm had no nucleic acid and protein. Infrared spectral analysis that six kinds of polysaccharides had characteristics of polysaccharide of receiving peak, medium AP 2 beta a pyranose, AP, AP 3, POJ 1, POJ a SS and POJ SJ are beta furanose. Through Department of acid hydrolysis, periodate oxidation, Smith degradation, FTIR and AFM analysis, confirm the structure: POJ SS polysaccharide chain connection methods on the grounds of beta (1, 3) a furan dextran backbone and by (1, 2) a mannose, glucose, arabinose residues constitute side chain. The interface methods of AP 1 polysaccharide chain is composed of a beta - (1, 3) a pyran dextran and (1 - 4) arabinos and by (1, 2) a mannose, fructose, glucose, arabinose residues cohesion constitute the side chain branch. POJ 1 and AP one of the 3 of the multi - sugar chain of the convergence of the (1, 3), a type of the main chain, POJ 1 by (2 1, 4) a glucose, fructose sugar residues constitute a side chain. AP 3 (1 - > 2) a mannose, glucose, fructose and glucose residues目录:摘要3-5Abstract5-8第一章 前言12-35&&&&1.麦冬研究概况12-15&&&&&&&&1.1 麦冬的化学成分12-13&&&&&&&&1.2 麦冬的药理作用13-15&&&&2.多糖的研究概况15-32&&&&&&&&2.1 多糖的发展历史及其发展方向15-16&&&&&&&&2.2 多糖的研究方法16-32&&&&&&&&&&&&2.2.1 多糖的来源16-17&&&&&&&&&&&&2.2.2 多糖的提取、分离和纯化17-19&&&&&&&&&&&&2.2.3 多糖的纯度鉴定19-20&&&&&&&&&&&&2.2.4 体外抗氧化活性20-24&&&&&&&&&&&&2.2.5 多糖的结构分析24-32&&&&3.本论文选题依据及主要研究内容32-35&&&&&&&&3.1 本论文的选题依据32-34&&&&&&&&3.2 本论文的主要研究内容34-35第二章 麦冬多糖的提取及分离纯化35-43&&&&1.试验材料、试剂及仪器35&&&&2.试验内容与方法35-37&&&&&&&&2.1 麦冬多糖的提取35-36&&&&&&&&&&&&2.1.1 麦冬多糖热水提取法35&&&&&&&&&&&&2.1.2 多糖含量的测定—苯酚-硫酸法35-36&&&&&&&&&&&&2.1.3 正交试验36&&&&&&&&&&&&2.1.4 紫外吸收及蛋白质的检测36&&&&&&&&2.2 麦冬多糖的分离、纯化36-37&&&&&&&&&&&&2.2.1 季胺盐沉淀法36-37&&&&&&&&&&&&2.2.2 DEAE纤维素柱层析法37&&&&3.试验结果与分析37-41&&&&&&&&3.1 多糖含量的测定37&&&&&&&&3.2 麦冬多糖的热水提取结果37-40&&&&&&&&&&&&3.2.1 温度对麦冬多糖提取率的影响37-38&&&&&&&&&&&&3.2.2 提取时间对麦冬多糖提取率的影响38&&&&&&&&&&&&3.2.3 液料比对麦冬多糖提取率的影响38-39&&&&&&&&&&&&3.2.4 技术参数的确定39-40&&&&&&&&3.3 麦冬多糖紫外吸收光谱扫描及蛋白质的检测结果40-41&&&&&&&&3.4 麦冬多糖的分离纯化结果分析41&&&&4.讨论41-43第三章 麦冬多糖的化学修饰43-47&&&&1.试验材料、试剂及仪器43&&&&2.试验内容与方法43-44&&&&&&&&2.1 麦冬多糖的硫酸化修饰43-44&&&&&&&&2.2 麦冬多糖的羧甲基化44&&&&3.试验结果与分析44-46&&&&&&&&3.1 麦冬多糖的硫酸化修饰44-45&&&&&&&&&&&&3.1.1 硫酸基的定性分析44-45&&&&&&&&&&&&3.1.2 硫酸基的定量测定45&&&&&&&&3.2 麦冬多糖的羧甲基化分析45-46&&&&4.讨论46-47第四章 麦冬多糖的初步结构分析47-65&&&&1.试验材料、试剂及仪器47-48&&&&2.试验内容与方法48-49&&&&&&&&2.1 分子量的测定48&&&&&&&&2.2 单糖组分分析48&&&&&&&&2.3 三氟乙酸部分酸水解48&&&&&&&&2.4 高碘酸氧化和smith降解48-49&&&&&&&&2.5 傅立叶变换红外光谱仪分析49&&&&&&&&2.6 原子力显微镜(AFM)分析49&&&&3.结果与分析49-63&&&&&&&&3.1 麦冬多糖分子量的测定结果49-50&&&&&&&&3.2 麦冬多糖单糖组分分析结果50-53&&&&&&&&&&&&3.2.1 标准混合单糖气相分析50-51&&&&&&&&&&&&3.2.2 麦冬多糖样品的单糖组成气相色谱分析51-53&&&&&&&&3.3 麦冬多糖三氟乙酸部分酸水解结果53-54&&&&&&&&3.4 高碘酸氧化和smith降解54-57&&&&&&&&3.5 红外光谱分析57-60&&&&&&&&3.6 原子力显微镜分析60-63&&&&4.讨论63-65第五章 麦冬多糖的体外抗氧化活性65-70&&&&1.试验材料、试剂及仪器65&&&&2.试验内容与方法65-66&&&&&&&&2.1 麦冬多糖还原能力测定65&&&&&&&&2.2 清除超氧阴离子自由基的测定65-66&&&&&&&&2.3 清除·OH自由基的能力测定66&&&&&&&&2.4 对Fe~(2+)诱导脂蛋白PUFA过氧化反应的抑制作用66&&&&3.试验结果与分析66-69&&&&&&&&3.1 麦冬多糖还原能力测定结果66-67&&&&&&&&3.2 麦冬多糖对超氧阴离子的清除作用67-68&&&&&&&&3.3 麦冬多糖对·OH的清除作用68&&&&&&&&3.4 麦冬多糖对Fe~(2+)诱导脂蛋白PUFA过氧化反应的抑制作用68-69&&&&4.讨论69-70参考文献70-77致谢77-78攻读学位期间研究成果78原价：￥20.00元折价：￥5.00元分享到：参考文献[1].王昒展.[D].东南大学.2013[2].王新超.[D].东南大学.2013[3].董晶晶.[D].河南中医学院.2012[4].郑晨星.[D].郑州大学.2013[5].车雪萍.[D].郑州大学.2013[6].乔家彬.[D].郑州大学.2013[7].陈敬友.[D].湖南科技大学.2013[8].潘样岐.[D].华中科技大学.2013[9].陆颖.[D].南京中医药大学.2013[10].郭大乐.[D].成都中医药大学.2012