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牛肌腱胶原的提取及生物相容性的研究--《第三军医大学》2007年硕士论文
牛肌腱胶原的提取及生物相容性的研究
【摘要】:
1、建立一种牛肌腱高效提取胶原蛋白的方法并对提取的胶原蛋白的生物学性能进行表征检测。2、观察牛肌腱胶原蛋白和鼠尾胶原蛋白构建的组织工程皮肤收缩情况。3、研究不同类型胶原蛋白对角质形成细胞粘附的影响,并用原子力显微镜观察胶原与种子细胞粘附的微观结构。4、利用天狼猩红偏振光法检测复方壳多糖组织工程皮肤中胶原合成与分泌情况。
1、建立了以酸酶联合提取牛肌腱胶原蛋白的方法,并对提取的牛肌腱胶原进行氨基酸含量、热变性温度、红外光谱及其它的一些生物学性能检测。2、新鲜清洁儿童包皮,用酶消化后分离培养角质形成细胞和成纤维细胞,用我科已建立的方法,分别采用牛肌腱胶原蛋白和鼠尾胶原蛋白构建复方壳多糖组织工程皮肤,观察不同类型胶原蛋白构建的组织工程皮肤的收缩情况,绘制收缩曲线。3、分别用牛肌腱胶原、鼠尾胶原和标准Ⅳ型胶原包被培养板,接种相同数量的原代角质细胞,在不同时相用活细胞电子计数仪测定未粘附细胞的数量,观察不同类型胶原所未粘附的细胞数量的多少,绘制细胞粘附曲线,并用原子力显微镜观察胶原蛋白与细胞的粘附情况。4、用我科已建立的方法,制备复方壳多糖组织工程皮肤,然后采用苦味酸-天狼星红染色,用偏振光显微镜观察, Photoshop半定量分析制备的复方壳多糖组织工程皮肤中Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成和分泌情况。
1、以牛肌腱为原料,用醋酸及水果蛋白酶的方法,可以高效率的提取胶原蛋白,经测定提取的胶原蛋白为Ⅰ型胶原蛋白。2、用牛肌腱胶原构建的组织工程皮肤其收缩度比相同浓度的鼠尾胶原构建的组织工程皮肤其收缩度小(P0.05)。3、接种1小时以内,Ⅳ型胶原对角质形成细胞的粘附特性强于牛肌腱胶原和鼠尾胶原,1小时以后,三者粘附差别不明显,牛肌腱胶原和鼠尾胶原亦无明显差异。4、原子力显微镜可以清晰的观察到胶原及胶原与细胞间粘附的微观结构。5、正常皮肤和复方壳多糖组织工程皮肤的真皮中都有Ⅰ、Ⅲ胶原,在正常皮肤的真皮中Ⅰ、Ⅲ胶原含量分别是98.51±11.28、33.93±3.90;培养成熟的复方壳多糖组织工程皮肤中Ⅰ、Ⅲ胶原含量分别是91.42±3.82、30.75±2.29,两者相比无明显差异(P 0.05)。复方壳多糖组织工程皮肤培养8天、15天、30天,组织内Ⅰ型胶原分别为50.75±4.22、63.57±6.87、91.42±3.82 ,Ⅲ型胶原分别为16.90±1.64、23.65±4.08、30.75±2.29,组间比较有显著差异(P0.01)。
1、酸酶相结合的方法可以高效率的从牛肌腱中提取胶原蛋白,用提取的牛肌腱胶原构建的组织工程皮肤其收缩度比鼠尾胶原构建的组织工程皮肤收缩度小,说明用牛肌腱胶原蛋白能显著降低组织工程皮肤的收缩度,证明组织工程皮肤制造选择牛肌腱胶原较好,能够提高产品的性能。2、牛肌腱胶原和鼠尾胶原与Ⅳ型胶原对角质形成细胞的粘附作用无明显差别,用原子力显微镜可以观察到胶原及胶原与细胞间粘附的微观结构。3、培养成熟的组织工程皮肤与正常人皮肤中胶原含量及分布无明显差异。组织工程皮肤不同的培养时期胶原的含量及种类有明显差异。并且,利用天狼猩红-偏振光法可以观察到组织工程皮肤和正常皮肤中胶原的分布,Ⅰ型胶原呈现红色或橙黄色,Ⅲ型胶原为绿色。
【关键词】:
【学位授予单位】:第三军医大学【学位级别】:硕士【学位授予年份】:2007【分类号】:R318【目录】:
英文缩写一览表5-6
英文摘要6-8
中文摘要8-10
论文正文 牛肌腱胶原的提取及生物相容性的研究10-58
第一部分 牛肌腱胶原的提取及其性能的检测13-27
材料和方法14-17
第二部分 胶原与细胞的粘附及构建的组织工程皮肤的收缩度的研究27-40
材料和方法27-31
第三部分 天狼猩红-偏振光法检测组织工程皮肤中胶原的研究40-45
材料和方法40-42
全文总结45-46
参考文献53-58
文献综述 胶原的提取及在组织工程皮肤中应用的研究进展58-77
参考文献70-77
攻读硕士学位期间发表的文章77
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胶原蛋白的提取及其对纺织材料的改性研究
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硕士学位论文
猪皮胶原蛋白提取及理化特性的研究
姓名:刁雪洋
申请学位级别:硕士
专业:农产品加工及贮藏工程
指导教师:李洪军
猪皮胶原蛋白的提取及理化特性研究
农产品加工及贮藏工程专业硕士研究生刁雪洋
李洪军教授
我国畜牧业发展迅速,全国猪肉年产量、肉制品及副产品加工总值逐年上升。目前,对
猪皮提取的胶原蛋白的功能特性有很多报道,但是在提取方法及提取率研究上不够深入,尚
未获得较高的提取率。本文通过对比几种辅助提取方法,选取超声波辅助酶法提取提高其提
取率,对胶原蛋白的工业化生产提供理论依据和实验指导。
本文主要选取荣昌猪的猪皮作为原料,并研究其猪皮胶原蛋白的含量及理化特性;猪皮
中非胶原蛋白成分的去除;酶法提取工艺中影响因素的研究;应用多种辅助提取方法振荡、
微波、超高压、超声波的研究,找出最优的辅助提取方法;酶法结合超声波辅助提取的响
应曲面分析研究;提取的胶原蛋白的纯化;纯化后的胶原蛋白的鉴定、基本理化特性及凝胶
特性的研究。现将主要研究结果总结如下:
本实验荣昌成年猪样品的总蛋白含量为.%±.,粗脂肪含量为.%±.,
水分含量为.%±.,灰分含量为.%.,其中胶原蛋白含量占总蛋白含量为.
%±.,荣昌乳猪的总蛋白含量为.%±.,粗脂肪含量为.%±.,水分含量
为.%±.,灰分含量为.±.,其中胶原蛋白含量占总蛋白含量为.%±.。
研究应用振荡、微波、超高压和超声波几种辅助提取方法对胶原蛋白进行提取,其
结果表明:振荡、微波、超高压辅助酶法提取胶原蛋白对胶原蛋白的产量没有显著的提高,
在运用超声波辅助酶法对胶原蛋白进行提取比单纯用酶法对胶原蛋白进行提取要高,提取率
达到.%,并且通过响应曲
正在加载中,请稍后...聚氨酯改性胶原蛋白的机理及应用研究(1)一氨基酸与甲苯二异氰酸酯的反应--《中国皮革》2008年21期
聚氨酯改性胶原蛋白的机理及应用研究(1)一氨基酸与甲苯二异氰酸酯的反应
【摘要】:选取具有不同侧链基团的氨基酸和甲苯二异氰酸酯,在催化剂存在的条件下进行液固反应,观察反应情况,用红外光谱对反应物进行表征。通过红外谱图及理论分析讨论得出,氨基酸中活性基团和甲苯二异氰酸酯中异氰酸酯基团的反应顺序,为聚氨酯改性胶原蛋白提供一定的理论依据。
【作者单位】:
【关键词】:
【基金】:
【分类号】:TS51【正文快照】:
月lJ吕由于制革生产要经过片皮、削匀、磨革和修边等工序,大量制革原料在生产过程中转变为固体废弃物,而它们的主要成分是胶原蛋白。如从中提取胶原蛋白,便可将其回用于制革生产或用作其它工业原料。胶原蛋白具有很强的亲水、保湿、手感舒适、光亮性好等优点,但如果将其
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京公网安备74号胶原蛋白改性聚丙烯腈纤维制备及性能表征--《功能材料》2013年10期
胶原蛋白改性聚丙烯腈纤维制备及性能表征
【摘要】:利用聚丙烯腈纤维和胶原蛋白为基本原料,采用水解-焙烘法制备具有高吸湿性和耐久性良好的胶原蛋白改性聚丙烯腈纤维。借助FT-IR、TG、XRD、DMA、SEM等分析和讨论了改性纤维的结构和性能。结果表明,与改性前相比,改性纤维的表面光滑,表层附有大量胶原蛋白成分,回潮率由2.0%提高到了6.1%,热分解温度由318℃下降到296℃,力学性能有所下降,改性纤维耐久性较好。
【作者单位】:
【关键词】:
【基金】:
【分类号】:TQ342.31【正文快照】:
1引言聚丙烯腈纤维是三大合成纤维之一,其吸湿差、容易产生静电,穿着有闷热不舒适感。如何使合成纤维天然化、如何改进聚丙烯腈纤维的亲水性,改善其服用的舒适性,赋予聚丙烯腈纤维新的性能,一直是人们关注的热点课题[1-3]。合成纤维进行表面处理的方法很多,如等离子体处理[4]
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